恭喜中国科学院南海海洋研究所张跃环获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国科学院南海海洋研究所申请的专利一种高效、快速的牡蛎纯系制种方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116267809B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310149112.2,技术领域涉及:A01K67/62;该发明授权一种高效、快速的牡蛎纯系制种方法是由张跃环;秦艳平;万韦韬;喻子牛设计研发完成,并于2023-02-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种高效、快速的牡蛎纯系制种方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种高效、快速的牡蛎纯系制种方法。它是利用四倍体精子作为雄性来源进行雌核发育诱导,解决以往靠雌核发育系和正常受精子代均为二倍体的难以区分或者区分不准的难题,实现了仅仅通过倍性检测就可以鉴别雌核发育子代的目的。通过超低密度培养,获得了真正意义上的雌核发育子代成体,解决了全球尚无贝类雌核发育成体“瓶颈”技术难题,填补了国际空白。通过连续两代雌核发育技术,扭转了以往认为雌核发育系无法存活的现状,在全世界第一次获得了经过遗传鉴定的贝类纯系,促使我国在该领域达到了国际领跑水平。
本发明授权一种高效、快速的牡蛎纯系制种方法在权利要求书中公布了:1.一种高效、快速的牡蛎纯系制种方法,其特征在于,包括以下步骤:a、雌核发育幼虫制备:首先解剖二倍体牡蛎,解剖获取卵子,获得卵液,将卵液利用海水激活;四倍体牡蛎的精子在紫外线照射下,使得精子遗传物质失活,但是具有激发受精能力条件,获得灭活精子;将灭活精子加入到激活的卵液中,当受精卵有30-50%释放第一极体的时候,加入细胞松弛素B处理,受精卵液的CB浓度控制在0.3-0.5mgL,再洗受精卵,放入孵化容器中进行孵化;受精卵发育至D形幼虫;利用流式细胞仪检测幼虫倍性,产生的二倍体均为雌核发育幼虫、三倍体均为正常受精尚未抑制住第二极体的幼虫、四倍体为均为正常受精抑制住第二极体的幼虫;b、幼虫超低密度培育:将雌核发育幼虫选育出来,二倍体比率在70%以上组合进行幼虫培育,培育过程中,控制投饵料,确保幼虫能吃饱且不超量,当幼虫发育至眼点阶段,此时,投放附着基采苗,获得雌核发育系稚贝;c、子代培养及其鉴定:雌核发育系稚贝经稚贝培养、幼贝育成及其成体养殖,对子代成体进行倍性鉴定,其中,二倍体均为雌核发育子代,剔除掉其中三倍体、四倍体及其非整倍体;鉴定好的雌核发育子代进行养成;d、二次雌核发育建立纯系:当一代雌核发育子代性腺成熟时,重复步骤a,制造卵液;利用灭活的四倍体牡蛎精子与其受精,当其受精卵30-50%出现第一极体时,加入细胞松弛素B处理,处理浓度为0.3-0.5mgL,再洗受精卵,放入孵化容器中进行孵化;受精卵发育至雌核发育二代的D形幼虫;利用流式细胞仪检测幼虫倍性,产生的二倍体均为雌核发育幼虫、三倍体均为正常受精尚未抑制住第二极体的幼虫、四倍体为均为正常受精抑制住第二极体的幼虫;之后继续重复步骤b-c,获得雌核发育二代子代,当其发育至成体阶段,利用流式细胞仪将二倍体筛选出来,剔除掉其他倍性个体,即连续两代的雌核发育系,即获得了纯系。
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