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恭喜福建省农业科学院生物技术研究所张洁获国家专利权

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龙图腾网恭喜福建省农业科学院生物技术研究所申请的专利一种东方百合高效遗传转化的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN117165625B

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-07发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202210588988.2,技术领域涉及:C12N15/84;该发明授权一种东方百合高效遗传转化的方法是由张洁;许鲁杰设计研发完成,并于2022-05-27向国家知识产权局提交的专利申请。

一种东方百合高效遗传转化的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种东方百合高效遗传转化的方法,其是采用东方百合的花丝作为转化材料,经农杆菌侵染与干燥共培养后,于一体化筛选培养基中直接诱导花丝分化为小鳞茎并生根,以实现诱导、膨大、生根一体的高效培养,建立了东方百合的高效遗传转化体系。本发明针对目前百合遗传转化效率低、受体材料不易获得、对农杆菌敏感等问题,提供了一种新的技术方法,其简单实用、易于操作,应用前景广阔。

本发明授权一种东方百合高效遗传转化的方法在权利要求书中公布了:1.一种东方百合高效遗传转化的方法,其特征在于,包括以下步骤:1)取无菌百合花丝,将其横切成长0.5-1cm的小段作为外植体,在超净工作台上干燥处理30min;2)将步骤1)制备好的外植体放入农杆菌侵染液中侵染10-15min,使花丝与农杆菌充分接触后,再转入干燥共培养基中,22-25℃暗培养2-3d;3)将步骤2)培养好的花丝置于250mgL的羧苄青霉素钠溶液中浸泡6-10min,然后用无菌水清洗3遍,置于无菌滤纸上吹干后,再转入一体化筛选培养基中,于22-25℃暗环境下进行培养,使花丝直接分化成小鳞茎并生根;步骤2)所述农杆菌侵染液是利用农杆菌菌种在添加有50mgLRif的LB固体培养基上划线,28℃暗培养3d后挑取单菌落,接入到含50mgLRif的LB液体培养基中,黑暗条件下28℃、180-220rpm振荡培养16h,再将培养后的菌液置于灭菌的离心管中,5000rpm离心5min收集菌体,用改良重悬液重悬菌体,调整至OD600值为0.3-0.5制得;所述改良重悬液为10mmolLMES+100μmolLAS+10mmolLMgCl2+10mgLLA,pH5.8;步骤2)所述干燥共培养基为MS+0.1mgLTDZ+1mgLNAA+1%肌醇母液+60gL蔗糖+100μmolLAS+10mgLLA+7gL琼脂,pH5.8,且培养基表面铺一层高压灭菌后的滤纸;步骤3)所述一体化筛选培养基为MS+0.1mgLTDZ+1mgLNAA+1%肌醇母液+75mgLKan+250mgLCef+60gL蔗糖+7gL琼脂,pH5.8;所述肌醇母液是将10g肌醇、0.2g甘氨酸、0.01g盐酸硫胺素、0.05g盐酸吡哆醇、0.05g烟酸加水溶解并定容至1L。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术,可联系本专利的申请人或专利权人福建省农业科学院生物技术研究所,其通讯地址为:350003 福建省福州市鼓楼区五四路247号;或者联系龙图腾网官方客服,联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。

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