恭喜四川大学华西医院王晴岚获国家专利权
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龙图腾网恭喜四川大学华西医院申请的专利一种分枝杆菌基因组的提取方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119162167B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-11发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411672643.0,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种分枝杆菌基因组的提取方法是由王晴岚;李为民;杨丹妮;张怡平;程静设计研发完成,并于2024-11-21向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种分枝杆菌基因组的提取方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种分枝杆菌基因组的提取方法,属于生物检测技术领域。本发明提供的分枝杆菌基因组的提取方法使用裂解酶LysA、LysB进行破壁处理,解决了现有技术中分枝杆菌基因组提取效果不佳的问题。本发明提取的结核分枝杆菌的基因组总量可达到传统经典CTAB基因组提取方法的5‑10倍左右,且得到的基因组片段的完整性有明显改善。相比传统CTAB基因组提取方法中使用溶菌酶过夜处理,本发明中LysA与LysB处理2小时即可达到数倍的提取效率,大大缩短了提取时长,优于传统CTAB基因组提取方法与市面上的基因组提取试剂盒,有利于临床与实验室快速高效提取得到完整的分枝杆菌基因组。
本发明授权一种分枝杆菌基因组的提取方法在权利要求书中公布了:1.一种分枝杆菌基因组的提取方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将分枝杆菌与醇试剂混合,离心后保留菌体沉淀1;S2、将菌体沉淀1与灭活剂混合,孵育后得到灭活菌体;S3、将所述灭活菌体进行梯度浓度醇试剂处理,离心后保留菌体沉淀2;S4、将菌体沉淀2与酶试剂混合,进行酶解处理,得到酶解产物;S5、将酶解产物利用CTAB法进行基因组提取;所述酶试剂中含有LysA蛋白和LysB蛋白;所述灭活剂中含有氯仿和甲醇;所述灭活剂中氯仿和甲醇的体积比为1.5~2.5:1;所述LysA蛋白和LysB蛋白的重量比为1:0.8~1.2。
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