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龙图腾网恭喜湖南工程学院申请的专利基于ExoⅢ驱动靶循环信号扩增和竞争性crRNA非对称级联信号扩增检测乳腺癌ctDNA的体系及方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119331978B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411899211.3，技术领域涉及：C12Q1/6886；该发明授权基于ExoⅢ驱动靶循环信号扩增和竞争性crRNA非对称级联信号扩增检测乳腺癌ctDNA的体系及方法是由张何;豆玉豪;马文杰;傅昕;陈勇;罗家美设计研发完成，并于2024-12-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本基于ExoⅢ驱动靶循环信号扩增和竞争性crRNA非对称级联信号扩增检测乳腺癌ctDNA的体系及方法在说明书摘要公布了：本发明提供了一种基于ExoⅢ驱动靶循环信号扩增和竞争性crRNA非对称级联信号扩增检测乳腺癌ctDNA的体系及方法，属于生物分析检测技术领域；通过ExoIII酶构建循环切割体系，将靶ctDNA信号循环转化为大量的ssDNAT信号并被完整crRNACas12a复合物特异性识别，实现第一重信号放大；利用竞争性crRNA介导的CRISPRCas12a非对称级联信号扩增构建第二重信号放大；完整crRNA和裂分型crRNA之间的竞争引起的CRISPRCas12a酶的构象重置会导致增强的荧光信号，降低背景信号，提高检测的灵敏度；操作步骤简单、检测流程简化、具有较高的检测效率、灵敏度和特异性。

本发明授权基于ExoⅢ驱动靶循环信号扩增和竞争性crRNA非对称级联信号扩增检测乳腺癌ctDNA的体系及方法在权利要求书中公布了：1.基于ExoIII驱动靶循环信号扩增和竞争性crRNA非对称级联信号扩增检测乳腺癌ctDNA的体系，其特征在于，所述体系包括核酸外切酶III、发夹探针、完整crRNA、裂分型crRNA、Split-T、LbCas12a酶、荧光探针；所述裂分型crRNA包括scaffoldRNA和spacerRNA两部分，在靶标ctDNA存在的情况下，引发ExoIIICas12a双酶协同催化扩增实现对靶标ctDNA的检测；所述发夹探针的序列如SEQIDNO.1所示；所述完整crRNA的序列如SEQIDNO.2所示；所述scaffoldRNA的序列如SEQIDNO.3所示；所述spacerRNA的序列如SEQIDNO.4所示；所述Split-T的序列如SEQIDNO.5所示；所述靶标ctDNA的序列如SEQIDNO.6所示；所述荧光探针的序列如SEQIDNO.7所示。

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