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龙图腾网恭喜广州栋方生物科技股份有限公司申请的专利一种基于包涵体形式表达的釉原蛋白的制备方法及产品和应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116239664B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202310198956.6，技术领域涉及：C07K14/47；该发明授权一种基于包涵体形式表达的釉原蛋白的制备方法及产品和应用是由汤杰;薛永永;蔡晓红;张启清;曾飒设计研发完成，并于2023-03-03向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种基于包涵体形式表达的釉原蛋白的制备方法及产品和应用在说明书摘要公布了：本发明提供一种基于包涵体形式表达的釉原蛋白制备方法及产品和应用，所述制备方法包括如下步骤：1使含有釉原蛋白基因的重组质粒在外源表达系统中进行表达，获得以包涵体形式存在的重组釉原蛋白；2使用含浓度梯度尿素的溶解液依次梯度溶解步骤1中所述包涵体，离心，得上清液和沉淀；3混合步骤2中所述上清液与复性剂，过滤，滤液脱盐制得所述基于包涵体形式表达的釉原蛋白。本发明创造性地应用含梯度浓度尿素的溶解液分离纯化釉原蛋白，加入不同浓度梯度的尿素梯度溶解包涵体，制得的目标蛋白纯度高、活性强。此外，该制备工艺操作简单，适宜工业放大。

本发明授权一种基于包涵体形式表达的釉原蛋白的制备方法及产品和应用在权利要求书中公布了：1.一种基于包涵体形式表达的釉原蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：（1）使含有人源釉原蛋白基因的重组质粒在原核表达系统中进行表达，获得以包涵体形式存在的重组人源釉原蛋白；（2）使用含浓度梯度范围为2-6M的尿素的溶解液依次梯度溶解步骤（1）中所述包涵体，离心，得上清液和沉淀；（3）混合步骤（2）中所述上清液与复性剂，过滤，滤液脱盐制得所述基于包涵体形式表达的人源釉原蛋白；步骤（2）所述溶解液的成分还包括20mMpH为9.0的Tris缓冲液、1%TritonX-100、1mMβ-巯基乙醇和0.1mMEDTA-2Na；步骤（2）所述尿素的初始浓度为2M，所述依次梯度溶解为尿素浓度由低至高梯度依次溶解，所述包涵体与单次溶解使用的溶解液的质量体积比为1:8-15gmL，所述梯度进行的次数为2-5次；步骤（3）所述复性剂包括20mMTris缓冲液、200mMNaCl、体积分数为10%的甘油、0.1mMEDTA-2Na和1mML-半胱氨酸，所述复性剂pH为7-9。

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