恭喜上海欧易生物医学科技有限公司范黎明获国家专利权
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龙图腾网恭喜上海欧易生物医学科技有限公司申请的专利一种适用于猕猴桃根组织单细胞测序的植物细胞核制备以及悬液优化方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115612720B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211189716.1,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权一种适用于猕猴桃根组织单细胞测序的植物细胞核制备以及悬液优化方法是由范黎明;朱燕敏;佟思雨;王佳琦;殷昊;肖云平设计研发完成,并于2022-09-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种适用于猕猴桃根组织单细胞测序的植物细胞核制备以及悬液优化方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的制备方法,通过独创的裂解液配方和细胞核悬液优化方法制备得到细胞核质量很高。与现有技术中6~7种组分的裂解液配方相比,本发明裂解液配方显著减少;实验流程在30分钟内即可完成细胞核的制备。本发明所述方法避免蔗糖沉积等步骤,节约试剂、耗材,降低成本,同时大大缩短时间,提高效率,便于大量样本实验的开展。本发明还公开了一种KR裂解液,试剂试剂盒及其在制备适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的方法中的应用。
本发明授权一种适用于猕猴桃根组织单细胞测序的植物细胞核制备以及悬液优化方法在权利要求书中公布了:1.一种适用于单细胞测序的猕猴桃根组织细胞核的制备方法,其特征在于,包括如下具体步骤:1)配置KR裂解液:首先配置KR裂解液,并将配置好的溶液预冷;所述KR裂解液包含以下成份:2%~3%(vv)L-酒石酸、15~25mM柠檬酸钠、0.2~0.4%(mv)皂素、0.2~0.4UmL重组型RNase抑制剂;2)破碎样本:将新鲜取材或者冻存的猕猴桃根组织样本转入离心管,加入预冷的所述KR裂解液及钢珠,依照仪器操作说明置于破碎仪上对组织进行破碎;3)裂解细胞:破碎后将离心管置于冰上孵育裂解;4)筛网过滤:将裂解后的组织裂解液转入离心管中,加入预冷的PBS,冰上静置1分钟,吸出组织裂解液,加入滤网中进行过滤得到过滤液;5)筛网过滤:使用滤网对步骤4)中的过滤液再进行一次过滤;6)离心收集沉淀:将步骤5)中的过滤液进行离心,丢弃上清,沉淀使用PBS进行重悬;7)过滤:将步骤6)中的沉淀重悬液全部加入分选柱中进行过滤;8)离心收集沉淀:将步骤7)中的过滤液进行离心,丢弃上清,沉淀使用PBS进行重悬。
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