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龙图腾网恭喜华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司申请的专利pSFV-p54复制子颗粒及其制备方法与应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN113652405B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-18发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110968210.X，技术领域涉及：C12N7/01；该发明授权pSFV-p54复制子颗粒及其制备方法与应用是由方倪冉;郑航辉;温良海;杨斌;徐婷设计研发完成，并于2021-08-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本pSFV-p54复制子颗粒及其制备方法与应用在说明书摘要公布了：本发明属于基因工程技术领域，公开了一种pSFV‑p54复制子颗粒及其制备方法与应用。所述pSFV‑p54复制子颗粒的制备方法，包括以下步骤：1以pSFV‑sp6‑EGFP质粒和flag‑p54基因为材料，构建得到pSFV‑sp6‑p54质粒；所述flag‑p54基因如SEQIDNO：1所示；2分别将SFV‑helper辅助质粒和所述pSFV‑sp6‑p54质粒线性化并进行体外转录，将所得mRNA共电转入BHK细胞或Vero细胞中，得到pSFV‑p54复制子颗粒。本发明通过以塞姆利基森林病毒为载体，插入非洲猪瘟p54基因，所制得的pSFV‑p54复制子颗粒能够高效表达非洲猪瘟病毒p54蛋白，且具有较高的生物安全性，可应用于研制非洲猪瘟相关疫苗。

本发明授权pSFV-p54复制子颗粒及其制备方法与应用在权利要求书中公布了：1.一种pSFV-p54复制子颗粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）以pSFV-sp6-EGFP质粒和flag-p54基因为材料，构建得到pSFV-sp6-p54质粒；所述flag-p54基因如SEQIDNO：1所示，所述pSFV-sp6-EGFP质粒序列如SEQIDNO：4所示；（2）分别将SFV-helper辅助质粒和所述pSFV-sp6-p54质粒线性化并进行体外转录，得到相应的mRNA，将所得mRNA共电转入BHK细胞或Vero细胞中，得到pSFV-p54复制子颗粒；所述SFV-helper辅助质粒序列如SEQIDNO：5所示；所述步骤（1）包括以下步骤：使用BamHISmaI内切酶对pSFV-sp6-EGFP质粒进行双酶切，将酶切产物与flag-p54基因进行同源重组，得到重组产物；将所述重组产物导入感受态细胞，鉴定，提取得到pSFV-sp6-p54质粒；采用如SEQIDNO：2-3所示的引物对重组产物进行所述鉴定；所述感受态细胞为DH5α细胞或Trans1-T1PhageResistant化学感受态细胞；步骤（1）还包括对所述pSFV-sp6-p54质粒进行酶切鉴定及测序的操作；步骤（2）中采用SpaI酶切使所述pSFV-sp6-p54质粒线性化，采用SpeI酶切使所述SFV-helper辅助质粒线性化。

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