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龙图腾网恭喜苏州依科赛生物科技股份有限公司申请的专利一种适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养基、方法及应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119040246B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-04发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411518129.1，技术领域涉及：C12N5/071；该发明授权一种适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养基、方法及应用是由赵亚;辛丽丽;向琼;陈旭;陈刚设计研发完成，并于2024-10-29向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养基、方法及应用在说明书摘要公布了：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养基、方法及应用。培养基包括基础培养基、补料培养基以及中间添加剂，所述的基础培养基为CHO无血清基础培养基CE06，所述的补料培养基为CHO无血清瞬转补料培养基CA06。本申请工艺在转染后第10天的蛋白产量可超过1.85gL，同比增加60%以上，对于CHO瞬转体系，尤其是难表达蛋白，该提升十分显著。

本发明授权一种适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养基、方法及应用在权利要求书中公布了：1.一种适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养方法，其特征在于，适用于CHO细胞高密度瞬时转染的培养基包括基础培养基、补料培养基以及中间添加剂，所述的基础培养基为CHO无血清基础培养基CE06，所述的补料培养基为CHO无血清瞬转补料培养基CA06；所述的中间添加剂为：L-天冬氨酸4gL、L-丝氨酸1.5gL、L-甘氨酸1.2gL、L-天冬酰胺2gL、L-精氨酸3gL、L-组氨酸2gL、L-异亮氨酸4gL、L-亮氨酸12gL、L-赖氨酸3gL、L-蛋氨酸2gL、L-苯丙氨酸5gL、L-苏氨酸4gL、L-色氨酸2.8gL、L-酪氨酸10gL、L-缬氨酸3gL、L-半胱氨酸4.4gL、L-谷氨酸4gL、L-丙氨酸5gL、L-谷氨酰胺4gL、腺苷0.02gL、尿苷0.02gL、鸟苷0.02gL、丙戊酸0.2gL、胰岛素生长因子0.0008gL、硫酸锰0.000005gL、氯化钙0.01gL、氯化镁0.5gL、硫酸锌0.04gL；具体步骤包括：步骤1：在CHO无血清瞬转基础培养基CE06中培养CHO细胞，以细胞密度0.2×106细胞数mL进行传代培养，每三天传代一次，传代三次后，用于转染实验，保证细胞活率大于90%；步骤2：转染当天，按照10×106细胞数mL接种密度，计算所需种子细胞液，离心去除上清，补充新鲜的CHO无血清瞬转基础培养基CE06培养基，制备细胞悬液，加入PEI-MaxDNA复合物，所述PEI-MaxDNA复合物中的PEI-Max浓度为3mgL，所述PEI-MaxDNA复合物中的DNA浓度为12mgL，放入摇床，进行培养，培养条件：37℃、5%二氧化碳、100~120rpm；步骤3：转染后4小时，按5%的体积比例添加CHO无血清瞬转补料培养基CA06，培养24小时后，添加所述的中间添加剂，补糖至12gL，培养温度由37℃降至33℃，继续培养，培养48小时后，按5%的体积比例添加CHO无血清瞬转补料培养基CA06，并补糖至12gL，培养72小时后，补糖至12gL，培养96小时后，按5%的体积比例添加CHO无血清瞬转补料培养基CA06，并补糖至12gL，每天监测糖含量并及时补糖至12gL，培养至第10天，收获细胞。

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