恭喜云南省农业科学院花卉研究所余蓉培获国家专利权
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龙图腾网恭喜云南省农业科学院花卉研究所申请的专利不携带CymMV和ORSV的蝴蝶兰组培苗培育方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116686715B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-25发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202310917822.5,技术领域涉及:C12Q1/6895;该发明授权不携带CymMV和ORSV的蝴蝶兰组培苗培育方法是由余蓉培;瞿素萍;阮继伟;单芹丽;卢珍红;吴旻设计研发完成,并于2023-07-25向国家知识产权局提交的专利申请。
本不携带CymMV和ORSV的蝴蝶兰组培苗培育方法在说明书摘要公布了:本发明公开了不携带CymMV和ORSV的蝴蝶兰组培苗培育方法,包括以下步骤:组培外植体的筛选、花梗腋芽的诱导、茎尖不定芽的诱导及筛选、丛生芽的诱导、组培苗的培养和组培苗的检测。本发明结合组培繁殖技术和灵敏可靠的病毒检测技术,建立了一种不携带建兰花叶病毒Cymbidiummosaicvirus,CymMV和齿兰环斑病毒Odontoglossumringspotvirus,ORSV的蝴蝶兰组培苗培育的可靠方法,从种源上阻断CymMV和ORSV在蝴蝶兰下游生产环节中的传播,提高蝴蝶兰产品的品质,并且节省培育时间、人力和物力,培育效率高。
本发明授权不携带CymMV和ORSV的蝴蝶兰组培苗培育方法在权利要求书中公布了:1.不携带CymMV和ORSV的蝴蝶兰组培苗培育方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:组培外植体的筛选步骤1.1:基于RT-PCR进行病毒检测:选择表型性状正常的蝴蝶兰植株,以叶片为材料,分别采用RT-PCR进行CymMV和ORSV检测;步骤1.2:基于qRT-PCR进行病毒检测:对步骤1.1中RT-PCR检测结果为阴性的植株,取生长健壮的各花梗节位,对各花梗节位的花梗苞片分别采用qRT-PCR进行CymMV和ORSV检测,选取检测结果Cq值≥35的各花梗苞片对应的花梗节位作为组培外植体使用,所述花梗苞片是指每个花梗节位腋芽外侧覆盖的苞片;步骤2:花梗腋芽的诱导将步骤1筛选出来的组培外植体进行消毒灭菌,接种于花梗腋芽诱导培养基上,先暗培养2周,随后在弱光环境中进行花梗腋芽的诱导;步骤3:茎尖不定芽的诱导及筛选步骤3.1:使用步骤2诱导得到的粗壮腋芽剥取茎尖,接种于不定芽诱导培养基上,暗培养2~3周,随后转入弱光环境中进行培养;步骤3.2:对诱导得到的不定芽采用“双重检测法”进行CymMV和ORSV检测,选取检测结果为双阴性的不定芽用于丛生芽的诱导;所述“双重检测法”为同时使用RT-PCR和qRT-PCR进行检测;步骤4:丛生芽的诱导将步骤3中筛选得到的不定芽接种于丛生芽诱导培养基上,在弱光环境中进行丛生芽的诱导;步骤5:组培苗的培养将步骤4诱导得到的丛生芽分割成单个芽体接种于组培苗培养基上进行组培苗的培养;步骤6:组培苗的检测对步骤5获得的组培苗进行抽检,采用“双重检测法”进行CymMV和ORSV检测,抽检组培苗检测结果均为双阴性,则该批次组培苗均可作为不携带CymMV和ORSV的组培苗用于后续盆栽生产。
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