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龙图腾网获悉成都市食品检验研究院;成都理工大学申请的专利一种非靶向检测水生生态系统中86种荷尔蒙干扰物的方法，以及荷尔蒙干扰物生态风险评价方法、优控排序方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119355175B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202411898069.0，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种非靶向检测水生生态系统中86种荷尔蒙干扰物的方法，以及荷尔蒙干扰物生态风险评价方法、优控排序方法是由郭添荣;蒲生彦;悦清楠;黄弋耘;王心怡;余东;吴文林设计研发完成，并于2024-12-23向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种非靶向检测水生生态系统中86种荷尔蒙干扰物的方法，以及荷尔蒙干扰物生态风险评价方法、优控排序方法在说明书摘要公布了：本发明提供了本发明涉及一种非靶向检测水生生态系统中86种荷尔蒙干扰物的方法，以及荷尔蒙干扰物生态风险评价方法、优控排序方法，属于检测领域。本发明方法包括如下步骤：a、水生生态系统中样品的前处理；b、采用超高效液相色谱‑高分辨质谱UHPLC‑HRMS检测。本发明还提供了一种86种荷尔蒙干扰物电子身份信息数据库的构建方法，以及一种荷尔蒙干扰物生态风险评价方法和荷尔蒙干扰物的优控排序方法。本发明揭示了HDCs在跨界面水生生态系统中的赋存格局、时空演化规律及主要驱动因素，进行了健康风险评估和基于生态风险的优先控制锁定，填补了目前文献中仅涉及环境或食品检测但无系统生态风险追踪的技术空白。

本发明授权一种非靶向检测水生生态系统中86种荷尔蒙干扰物的方法，以及荷尔蒙干扰物生态风险评价方法、优控排序方法在权利要求书中公布了：1.一种非靶向检测水生生态系统中86种荷尔蒙干扰物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：a、水生生态系统中样品的前处理；b、采用超高效液相色谱-高分辨质谱UHPLC-HRMS检测，色谱条件为：色谱柱：WatersXBridgeC183.0×150mm，2.5μm；色谱柱温度：40℃；流速：0.2mLmin；进样量：10μL；流动相Ⅰ：1mmolL含0.1%甲酸的甲酸铵水溶液-乙腈；流动相II：0.01%氨水水溶液-乙腈；先经过流动相Ⅰ梯度洗脱，再经流动相II梯度洗脱，其中流动相Ⅰ洗脱的洗脱程序为： ；流动相II的洗脱程序为： ；HRMS条件：离子源：HESI源；喷雾电压：正离子模式3.0kV，负离子模式2.5kV；离子传输管温度：325°C；鞘气N2流速：50arb；辅助气N2流速：10arb；吹扫气N2流速：1arb；加热气温度：350°C；RF-lens电压：35%；扫描模式：正负离子同时扫描；采集方式：FullMSdd-MS2；扫描范围：100-1000mz；分辨率：一级60000，二级15000；自动增益控制：标准；最大注射时间：自动；循环计数：二级3次；隔离窗口：2mz；动态排除：3.0s；采用归一化碰撞能通过针泵进标准品溶液优化能量至最佳；所述的86种荷尔蒙干扰物为：去氢睾酮、表睾酮、氟甲睾酮、甲睾酮、丙酸诺龙、诺龙、丙酸睾酮、群勃龙、美雄酮、苯丙酸诺龙、司坦唑醇、去甲雄烯二酮、雄烯二酮、17α-甲基异睾酮、美雄醇、表雄酮、17β-羟基雄烷-3-酮、美睾酮、达那唑、脱氢雄甾酮、烯丙孕素、氯地孕酮醋酸酯、左炔诺孕酮、甲羟孕酮醋酸酯、醋酸甲地孕酮、醋酸美仑孕酮、炔诺酮、醋酸炔诺酮、21-α-羟基孕酮、炔诺醇、17-α-羟孕酮、丙酸倍氯米松、倍他米松、醋酸可的松、氢化可的松、甲基泼尼松龙、泼尼松龙、曲安奈德、曲安西龙、可的松、地塞米松、醋酸氢化可的松、倍氯米松、氟米松、布地奈德、醋酸氟轻松、醋酸氟氢可的松、氟米龙、丙酸氯倍他索、醛固酮、泼尼松、雌三醇、雌酮、己二烯雌酚、己烯雌酚、己烷雌酚、雌二醇、17α-雌二醇、17β-雌二醇、辛基酚、4-壬基酚、双酚A、炔雌醇、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、克伦特罗、莱克多巴胺、氯丙那林、喷布特罗、奥西那林、福莫特罗、非诺特罗、塞布特罗、班布特罗、沙丁胺醇、特布他林、妥布特罗、西马特罗、马布特罗、马贲特罗、沙美特罗、齐帕特罗、溴布特罗；所述的水生生态系统包括水、水中的沉积物或悬浮物、水产食品；前处理方法分别为：a、水样前处理：1L静置水样通过0.45μm超细玻璃纤维微孔滤膜过滤去除可视悬浮颗粒物后，加入0.25gNa2EDTA，用1molL盐酸调整pH至3.0±0.5，过6cc200mgOasis®PRiMEHLB固相萃取柱富集，然后离心干燥萃取，用12mL甲醇溶液洗脱，洗脱液合并浓缩至1mL，用0.22μm尼龙有机相针式微孔滤膜过滤提取液，色谱进样小瓶保存于-18°C；b、沉积物和悬浮物前处理：样品在黑暗中冷冻干燥24h，通过100目孔径筛子研磨均质，称取5.00g匀浆试样，置于50mL聚丙烯离心管中，加入0.25gNa2EDTA，与pH=3的柠檬酸缓冲液和5mL乙腈混合，快速剧烈振摇并旋涡振荡10min，2000rmin，使样品充分散开，超声提取10min，9500rmin高速离心5min，取上清液置于50mL聚丙烯PP离心管中，上述提取过程重复第二次提取，并将两次提取的上清液混合，然后用Milli-Q水稀释至300mL，再根据水样前处理方法对样品进行纯化和富集；c、水产食品前处理：样品经宰杀后保留可食用部分均质匀浆，用准确称取5.00g匀浆试样，置于50mLPP离心管中，加入含0.2%甲酸的80%乙腈水溶液20mL，静置10min后再加入两粒陶瓷均质子，快速剧烈振摇并旋涡振荡10min，2000rmin，使样品充分散开，超声提取10min，9500rmin高速离心5min，取上清液待净化，取5mL准确量取的上清液过6cc200mg的Oasis®PRiMEHLB固相萃取柱，流速为1滴s，收集3-5mL后半段流出液并准确量取2mL，氮气下吹干至1mL，初始流动相定容，过用0.22μm尼龙有机相针式微孔滤膜，色谱进样小瓶保存于-18°C。

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