恭喜深圳华大智造科技股份有限公司夏军获国家专利权
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龙图腾网恭喜深圳华大智造科技股份有限公司申请的专利一种单细胞全长转录本建库测序方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115873922B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202111141720.6,技术领域涉及:C12Q1/6806;该发明授权一种单细胞全长转录本建库测序方法是由夏军;刘萍;赵霞;张恬颖;宋喆;史千玉;杨新设计研发完成,并于2021-09-28向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种单细胞全长转录本建库测序方法在说明书摘要公布了:本发明公开了单细胞全长转录本建库测序方法。本发明提供了一种单细胞全长转录本建库测序方法,包括如下步骤:A对单细胞的mRNA进行单细胞标记和U组合标记;B将所述双标记cDNA进行预扩增、打断、文库构建,得到单细胞全长转录本文库;C测序所述单细胞全长转录本文库,实现单细胞全长转录本建库测序。本发明使用胞嘧啶与甲基化胞嘧啶或羟甲基化胞嘧啶可以在重亚硫酸盐或脱氨酶的作用发生转化而发生碱基改变变成T基础上,使用甲基化胞嘧啶或羟甲基化胞嘧啶在逆转录时加入到cDNA上的位置组合来对原始的RNA分子进行标记,利用标记来确定测序序列是否来自同一RNA分子,从而组装成全长转录本。
本发明授权一种单细胞全长转录本建库测序方法在权利要求书中公布了:1.一种单细胞全长转录本建库测序方法,包括如下步骤:A对单细胞的mRNA进行双标记和C转化,得到双标记cDNA;所述双标记包括单细胞标记和U组合标记;所述单细胞标记为用带有单细胞标记序列的PolyT的oligo引物捕获所述mRNA;所述U组合标记为将所述mRNA在模板转换TSO引物和逆转录酶作用下进行逆转录和模板转换反应,且反应时加入甲基化C或羟甲基化C进行实现再次标记,形成带有甲基化C和非甲基化C组合标记的cDNA;所述C转化为将所述带有单细胞标记序列以及甲基化C和非甲基化C组合标记的cDNA中的甲基化C转化为U,得到不同位置U碱基和非甲基化C的组合标记的cDNA,记作双标记cDNA;或所述C转化为将所述带有单细胞标记序列以及甲基化C和非甲基化C组合标记的cDNA中的非甲基化C转化为U,得到不同位置U碱基和甲基化C的组合标记的cDNA,记作双标记cDNA;B)将所述双标记cDNA进行预扩增、打断、文库构建,得到单细胞全长转录本文库;C)测序所述单细胞全长转录本文库,实现单细胞全长转录本建库测序。
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