恭喜深圳华大智造科技股份有限公司龚梅花获国家专利权
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龙图腾网恭喜深圳华大智造科技股份有限公司申请的专利同步进行DNA正义链和反义链测序的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN114846153B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-04-29发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202080087320.9,技术领域涉及:C12Q1/6869;该发明授权同步进行DNA正义链和反义链测序的方法是由龚梅花;刘生茂;徐崇钧;周爽;王静静;李计广;韦小芳;蒋慧;刘健设计研发完成,并于2020-01-17向国家知识产权局提交的专利申请。
本同步进行DNA正义链和反义链测序的方法在说明书摘要公布了:一种同步进行DNA正义链和反义链测序的方法,包括:以待测序的环状DNA分子为模板进行第一轮滚环扩增生成第一部分模板链;在第一部分模板链上杂交上阻断或未阻断的扩增引物,然后继续以环状DNA分子为扩增模板进行第二轮滚环扩增生成第二部分模板链;以第一部分模板链和第二部分模板链中的任一部分模板链作为一链测序模板,以另一部分模板链为扩增模板进行多重置换扩增生成二链测序模板;分别在一链测序模板和二链测序模板上杂交上一链测序引物和二链测序引物,同时进行一链测序和二链测序,得到DNA正义链和反义链的序列。本发明的方法可实现同时从DNA的两端进行测序,从而大大节省测序时间和测序成本,提高测序通量。
本发明授权同步进行DNA正义链和反义链测序的方法在权利要求书中公布了:1.一种同步进行DNA正义链和反义链测序的方法,其特征在于,所述方法包括:以待测序的环状DNA分子为扩增模板进行第一轮滚环扩增,生成第一部分模板链;在所述第一部分模板链上杂交上阻断的扩增引物,然后继续以所述环状DNA分子为扩增模板继续进行第二轮滚环扩增,生成第二部分模板链;以所述第一部分模板链和所述第二部分模板链中的任一部分模板链作为一链测序模板,以另一部分模板链为扩增模板进行多重置换扩增生成二链测序模板;或者,在所述第一部分模板链上杂交上未阻断的扩增引物,然后继续以所述环状DNA分子为扩增模板继续进行第二轮滚环扩增,生成第二部分模板链;以所述第二部分模板链作为一链测序模板,以所述第一部分模板链为扩增模板进行多重置换扩增生成二链测序模板;分别在所述一链测序模板和二链测序模板上杂交上一链测序引物和二链测序引物,同时进行一链测序和二链测序,得到所述DNA正义链和反义链的序列;所述方法中通过控制所述滚环扩增和所述多重置换扩增的时间来控制所述一链测序模板和二链测序模板的拷贝数;所述一链测序模板和二链测序模板的拷贝数之间存在倍数差异,以便在测序过程中通过所述倍数差异带来的信号强度差异对测序的碱基进行定位。
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