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龙图腾网恭喜内蒙古农业大学申请的专利一种测定酵母培养物中酵母β-葡聚糖含量的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN119574753B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-02发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202510138623.3，技术领域涉及：G01N30/02；该发明授权一种测定酵母培养物中酵母β-葡聚糖含量的方法是由刘大程;张小洁;徐子萱;云梓辰;刘世雄设计研发完成，并于2025-02-08向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种测定酵母培养物中酵母β-葡聚糖含量的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种测定酵母培养物中酵母β‑葡聚糖含量的方法，属于化学分析技术领域，方法包括：预处理；总葡聚糖水解；α‑葡聚糖水解；谷物β‑葡聚糖水解；衍生化反应；标准曲线的绘制和测定。本发明方法具有高精密度、良好的重复性和可行性，对酵母培养物中酵母β‑葡聚糖含量的准确检测具有参考价值。本发明方法将为酵母培养物的进一步开发和制备提供参考，并为相关领域的发展提供更多有价值的科学依据。通过这种方法，我们可以更准确地评估酵母培养物中酵母β‑葡聚糖的含量，从而确保产品质量的准确性。

本发明授权一种测定酵母培养物中酵母β-葡聚糖含量的方法在权利要求书中公布了：1.一种测定酵母培养物中酵母β-葡聚糖含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：1预处理：将待测酵母培养物样品、已知纯度的酵母β-葡聚糖对照品和已知纯度的谷物β-葡聚糖对照品粉碎后过筛，备用；2总葡聚糖水解：称取预处理后的待测样品和已知纯度的酵母β-葡聚糖对照品，分别加入硫酸水溶液后进行冰水浴，然后加入超纯水进行沸水浴，再用乙酸钠缓冲液转移沸水浴后的溶液至容量瓶中，再然后向容量瓶中加入氢氧化钠水溶液进行中和，最后用乙酸钠缓冲液定容，取水解后的溶液进行离心，收集上清液至离心管中，向离心管中加入外切-1，3-β-葡聚糖酶与β-葡萄糖苷酶的混悬液后进行水浴加热，得到样品溶液A和对照品溶液A；α-葡聚糖水解：称取预处理后的待测样品和已知纯度的酵母β-葡聚糖对照品，分别加入氢氧化钠水溶液后进行冰水浴，同时磁力搅拌，随后加入乙酸钠缓冲液混合，再加入淀粉葡糖苷酶与蔗糖酶的混悬液和海藻糖酶混悬液进行水浴加热，最后用超纯水转移水浴加热后的溶液至容量瓶中并定容，取水解后的溶液进行离心，收集上清液至离心管中，得到样品溶液B和对照品溶液B；谷物β-葡聚糖水解：称取预处理后的待测样品和已知纯度的谷物β-葡聚糖对照品，分别加入乙醇水溶液和磷酸钠缓冲液后进行沸水浴，然后进行水浴加热，再加入内切-1,3-1,4-β-葡聚糖水解酶的混悬液，继续水浴加热，最后用乙酸钠缓冲液转移水浴加热后的溶液至容量瓶中并定容，取水解后的溶液进行离心，收集上清液至离心管，向离心管中加入β-葡萄糖苷酶的混悬液后进行水浴加热，得到样品溶液C和对照品溶液C；3衍生化反应：取步骤2得到的样品溶液A、样品溶液B、样品溶液C、对照品溶液A、对照品溶液B、对照品溶液C，分别加入PMP-甲醇溶液和氢氧化钠水溶液后进行水浴加热，然后加入盐酸，再用三氯甲烷重复萃取多次，最后取上层水相进行离心，收集上清液过膜，得到供试品溶液A、供试品溶液B、供试品溶液C、供试品溶液A对照、供试品溶液B对照和供试品溶液C对照；4标准曲线的绘制和测定：将葡萄糖标准品加入超纯水溶解，配制成1mgmL的标准储备液，4℃保存，将标准储备液稀释成浓度分别为0.5、5、10、50、100、400μgmL的标准系列工作液，现用现配；将标准系列工作液分别按照步骤3进行衍生化反应；将衍生化反应后的标准系列工作液和供试品溶液A、供试品溶液B、供试品溶液C、供试品溶液A对照、供试品溶液B对照和供试品溶液C对照分别采用高效液相色谱仪进行测定，高效液相色谱条件为：色谱柱：AcclaimTMC30，5μm4.6×250mm液相色谱柱；流动相：浓度为0.1molL、pH为5.5的乙酸铵水溶液和乙腈的体积比为75:25的混合溶液；流速：1.0mLmin；柱温：35℃；检测器：紫外检测器；检测波长：254nm；进样量：10μL；对标准系列工作液的葡萄糖目标峰进行分析得到色谱峰面积，以标准系列工作液浓度为横坐标，以标准系列工作液的色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，获得线性回归方程，分别对供试品溶液A、供试品溶液B、供试品溶液C、供试品溶液A对照、供试品溶液B对照和供试品溶液C对照的葡萄糖目标峰进行分析得到色谱峰面积，通过线性回归方程，计算出供试品溶液A、供试品溶液B、供试品溶液C、供试品溶液A对照、供试品溶液B对照和供试品溶液C对照的葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，根据公式1-11计算待测酵母培养物样品中酵母β-葡聚糖的含量，计算公式为：XD＝XA-XB-XC1 X酵母对照-检测值＝XA对照-XB对照7X谷物对照-检测值＝XC对照8 式中：XD-待测酵母培养物样品中酵母β-葡聚糖的含量，以质量百分数表示，％；XA-供试品溶液A中总葡聚糖的含量，以质量百分数表示，％；XB-供试品溶液B中α-葡聚糖的含量，以质量百分数表示，％；XC-供试品溶液C中谷物β-葡聚糖的含量，以质量百分数表示，％；XA对照-供试品溶液A对照中总葡聚糖的含量，以质量百分数表示，％；XB对照-供试品溶液B对照中α-葡聚糖的含量，以质量百分数表示，％；X酵母对照-检测值-供试品溶液A对照中总葡聚糖的含量减去供试品溶液B对照中α-葡聚糖的含量，即供试品溶液A对照和供试品溶液B对照中检测到的酵母β-葡聚糖含量，以质量百分数表示，％；X谷物对照-检测值-供试品溶液C对照中谷物β-葡聚糖的含量，即供试品溶液C对照中检测到的谷物β-葡聚糖含量，以质量百分数表示，％；XC对照-即X谷物对照-检测值，供试品溶液C对照中谷物β-葡聚糖的含量，即以质量百分数表示，％；cA-供试品溶液A中葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；cB-供试品溶液B中葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；cC-供试品溶液C中葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；cA对照-供试品溶液A对照中葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；cB对照-供试品溶液B对照中葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；cC对照-供试品溶液C对照中葡萄糖色谱峰面积对应的浓度，μgmL；mA-总葡聚糖水解称取待测样品的质量，g；mB-α-葡聚糖水解称取待测样品的质量，g；mC-谷物β-葡聚糖水解称取待测样品的质量，g；mA对照-总葡聚糖水解称取酵母β-葡聚糖对照品的质量，g；mB对照-α-葡聚糖水解称取酵母β-葡聚糖对照品的质量，g；mC对照-谷物β-葡聚糖水解称取谷物β-葡聚糖对照品的质量，g；VA-总葡聚糖水解待测样品定容体积，mL；VB-α-葡聚糖水解待测样品定容体积，mL；VC-谷物β-葡聚糖水解待测样品定容体积，mL；VA对照-总葡聚糖水解酵母β-葡聚糖对照品定容体积，mL；VB对照-α-葡聚糖水解酵母β-葡聚糖对照品定容体积，mL；VC对照-谷物β-葡聚糖水解谷物β-葡聚糖对照品定容体积，mL；F酵母-待测样品在试验过程中总葡聚糖和α-葡聚糖被破坏或损耗造成的结果偏低的校正因子；F谷物-待测样品在试验过程中谷物β-葡聚糖被破坏或损耗造成的结果偏低的校正因子；P酵母-酵母β-葡聚糖对照品的纯度，％；P谷物-谷物β-葡聚糖对照品的纯度，％；W酵母-酵母β-葡聚糖对照品的水分含量，％；W谷物-谷物β-葡聚糖对照品的水分含量，％；8.5-总葡聚糖水解或谷物β-葡聚糖水解收集上清液制备样品溶液或对照品溶液，再加入PMP-甲醇溶液、氢氧化钠水溶液和盐酸后的上清液的体积稀释倍数；4.25-α-葡聚糖水解收集上清液制备样品溶液或对照品溶液，再加入PMP-甲醇溶液、氢氧化钠水溶液和盐酸后的上清液的体积稀释倍数；0.9-将葡萄糖含量换算成葡聚糖含量的系数；XA对照、XB对照、XC对照和XD做多个重复测定，测定结果以多个重复测定结果的算术平均值±标准差表示，保留3位有效数字。

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