恭喜中山大学纪静芸获国家专利权
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龙图腾网恭喜中山大学申请的专利一种从不同细胞组分分离提取纯化核酸的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119464274B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-02发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202510046541.6,技术领域涉及:C12N15/10;该发明授权一种从不同细胞组分分离提取纯化核酸的方法是由纪静芸设计研发完成,并于2025-01-13向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种从不同细胞组分分离提取纯化核酸的方法在说明书摘要公布了:本发明属于核酸提取技术领域,具体涉及一种从不同细胞组分分离提取纯化核酸的方法。本发明开发了适应于胞质组分和核游离组分等液相RNA的分离纯化方法,使提取的RNA能兼容核酸质谱及高通量测序的最高标准,并且使操作流程更简单,用时更短,成本更低,提取效果更好、更高效;同时在此基础上还开发了相应的核质DNARNA分离buffer,并配套高效的核酸纯化流程,使其在获得高质量染色质RNA的同时,也能将基因组DNA完整高质量高纯度的提取出来,为RNA动态生物学的经典组分分离方案提供了另一层面的信息,即基因组DNA信息,由此使细胞各组分的全部核酸信息都可以实现高效的分离纯化。
本发明授权一种从不同细胞组分分离提取纯化核酸的方法在权利要求书中公布了:1.一种从不同细胞组分分离提取纯化核酸的方法,其特征在于,采用试剂盒从不同细胞组分中分离提取纯化核酸,所述试剂盒包括RNA结合液、无水乙醇、RNA漂洗液1溶液、RNA漂洗液2溶液、核质DNARNA分离buffer、氯仿、DNA漂洗液;所述RNA结合液由1-8M硫氰酸胍和1MTris-HCl组成,PH=7.4;所述RNA漂洗液1溶液由80%乙醇和2M盐酸胍组成;所述RNA漂洗液2溶液为80%乙醇溶液;所述核质DNARNA分离buffer由裂解液和TRIZOL试剂按1:2的体积比组成,所述裂解液由4M硫氰酸胍和1MTris-HCl组成,PH=7.4;所述DNA漂洗液由80%乙醇和100mMNaCl组成;包括以下步骤:S1、从细胞中分离出胞质组分、核游离组分和染色体组分;S2、胞质组分或核游离组分的RNA提取:S21、往胞质组分或核游离组分中添加RNA结合液,再添加无水乙醇混匀;胞质组分或核游离组分、RNA结合液以及无水乙醇的体积比为1:1:2-4;S22、将S21的混合液与硅胶柱孵育,使RNA与硅胶柱结合;S23、往S22的硅胶柱中添加RNA漂洗液1溶液进行漂洗;S24、往S23的硅胶柱中添加RNA漂洗液2溶液进行漂洗,再经空甩、纯水洗脱后得到RNA样品;S3、染色质相关RNA和基因组DNA的共提取:S31、用核质DNARNA分离buffer溶解染色体组分,再加入氯仿,离心混匀并分层;S32、取S31中的上清液与硅胶柱孵育,使DNA与硅胶柱结合;S33、往S32的硅胶柱中添加DNA漂洗液进行漂洗,再经空甩、纯水洗脱后得到基因组DNA样品;S34、收集S32的流穿液,添加无水乙醇后将其与新的硅胶柱孵育,流穿液与无水乙醇的体积比为1:1-2,使RNA与硅胶柱结合,再按S23和S24进行处理后得到染色质RNA样品。
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