武汉科技大学顾潮江获国家专利权
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龙图腾网获悉武汉科技大学申请的专利一种可视化检测HIV的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN118240979B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202410486258.0,技术领域涉及:C12Q1/70;该发明授权一种可视化检测HIV的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法是由顾潮江;马妍;魏宛容设计研发完成,并于2024-04-22向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种可视化检测HIV的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种可视化检测HIV的CRISPR‑Cas12a系统以及检测方法,属于病毒检测技术领域。包括Cas12a蛋白、crRNA和荧光报告分子;所述crRNA的序列如SEQIDNO.1或SEQIDNO.2所示。本发明发现一种基于CRISPRCas12a系统的HIV核酸检测靶标位点,针对该位点利用CRISPRCas12a系统可实现HIV核酸检测,检测特异性好,灵敏度高,可具有更好的特异性和兼容性,检测成本低廉,操作方便、快捷。本发明的检出限值可达到1copiesμL,实现靶标单分子检测。
本发明授权一种可视化检测HIV的CRISPR-Cas12a系统以及检测方法在权利要求书中公布了:1.一种非疾病检测或治疗目的地HIV的检测方法,其特征在于,利用CRISPR-Cas12a系统对待测样本进行检测,判断是否含有HIV;所述CRISPR-Cas12a系统包括Cas12a蛋白、crRNA和荧光报告分子;所述crRNA中和病毒RNA稳定结合的序列如SEQIDNO.1所示;所述利用CRISPR-Cas12a系统对待测样本进行检测具体为:利用所述CRISPR-Cas12a系统对待测样本进行酶切反应;所述酶切反应的温度为45℃;所述酶切反应的反应体系为25µL:CleavageBuffer2.5µL、Cas12a蛋白0.5µL、crRNA0.3µL、荧光报告分子1µL、待测样本5µL和H2O15.7µL;所述荧光报告分子为单链DNA寡聚脱氧核苷酸,其核苷酸序列如SEQIDNO.7所示;其一端带有荧光素FAM,另一端带有BHQ;在利用所述CRISPR-Cas12a系统对待测样本进行检测之前,还包括对待测样本进行扩增的过程;所述扩增为RAA扩增;所述RAA扩增时间为40min;所述RAA扩增的扩增引物由如SEQIDNO.3所示上游引物和如SEQIDNO.4所示下游引物组成。
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