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龙图腾网恭喜暨南大学申请的专利一种用于体外评估免疫细胞抗肿瘤活性的方法及其应用获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN118127118B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202410233340.2，技术领域涉及：C12Q1/02；该发明授权一种用于体外评估免疫细胞抗肿瘤活性的方法及其应用是由李海珊;苏子竣;尹芝南;林雪嘉;杨哲;江伟华设计研发完成，并于2024-03-01向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种用于体外评估免疫细胞抗肿瘤活性的方法及其应用在说明书摘要公布了：本发明公开了一种用于体外评估免疫细胞抗肿瘤活性的方法及其应用。本发明先构建共培养模型：1从健康人外周血中分离外周血单核细胞，经预刺激和扩增培养，得到γδT细胞；2将肿瘤组织利用肿瘤组织解离试剂盒TumorDissociationKit进行消化，然后将消化后的肿瘤细胞进行类器官培养，经筛选得到37μm～100μm的肿瘤类器官；3采用抗粘附试剂预包被Corning96孔全白平底聚苯乙烯微孔板，然后将肿瘤类器官铺板，计数后再与γδT细胞混合形成共培养体系，得到所述共培养模型；最后再进一步将该共培养模型用于抗肿瘤活性的评估，评价γδT细胞对肿瘤的杀伤作用。

本发明授权一种用于体外评估免疫细胞抗肿瘤活性的方法及其应用在权利要求书中公布了：1.一种用于评估抗肿瘤活性的免疫细胞和肿瘤类器官共培养模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：1从健康人外周血中分离外周血单核细胞，然后经γδT细胞预刺激培养和扩增培养，得到γδT细胞；2将肿瘤患者来源的肿瘤组织利用肿瘤组织解离试剂盒TumorDissociationKit于37℃、180～220rpm条件下消化20～60分钟，然后将消化后的肿瘤细胞过100μm细胞筛，并将肿瘤细胞离心收集后与基质胶混合均匀，加入类器官培养基进行类器官培养和传代培养，再采用37μm和100μm细胞筛对肿瘤类器官大小进行筛选，筛选得到37μm～100μm的人源化肿瘤类器官；3采用抗粘附试剂预包被Corning96孔全白平底聚苯乙烯微孔板，然后将步骤2中得到的人源化肿瘤类器官进行铺板处理，计数后再与步骤1中得到的γδT细胞按效靶比为1～10：1混合形成共培养体系，放入培养箱进行培养，得到所述用于评估抗肿瘤活性的免疫细胞和肿瘤类器官共培养模型；步骤1中所述的γδT细胞预刺激培养所用的培养液为γδT细胞预刺激培养液，其配方如下：无血清RPMI1640培养基，体积百分比10％的胎牛血清，体积百分比1％的青链霉素双抗，1200UImlHumanIL-2，50μM唑来膦酸；步骤1中所述的扩增培养所用的培养液为γδT细胞培养液，其配方如下：无血清RPMI1640培养基，体积百分比10％的胎牛血清，体积百分比1％的青链霉素双抗，300UImlHumanIL-2；步骤2中所述的消化所用的消化液通过如下方法制备得到：将325μlTumorDissociationKit和4.7mlwashing液混合均匀，得到消化液；其中，washing液配方如下：AdvancedDMEMF12培养基，Glutamax添加剂1×，1MHepes缓冲溶液，青链霉素3×，10μMY-27632；步骤2中所述的类器官培养基的配方如下：AdvancedDMEMF12培养基，B27添加剂1×，Glutamax添加剂1×，1MHepes缓冲液，青链霉素1×，5mM烟酰胺，1.25mM乙酰半胱氨酸，5μmY-27632，500nMA83-01，500nMSB202190，5ngml成纤维细胞生长因子7，20ngml成纤维细胞生长因子10，5ngml表皮生长因子，100ngmlNoggin，250ngmlR-spondin-1，5nMHeregulinβ-1，50μgml原代细胞抗生素Primocin；步骤2中所述的100μm细胞筛为100μmReversibleStrainer细胞筛；步骤2中所述的37μm细胞筛为37μmReversibleStrainer细胞筛；步骤3中所述的抗粘附试剂为Anti-adherenceRinsingSolution。

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