恭喜广州贝奥吉因生物科技股份有限公司冯龙宝获国家专利权
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龙图腾网恭喜广州贝奥吉因生物科技股份有限公司申请的专利基于NK细胞膜修饰的多功能锰基杂化纳米平台及其制备方法和应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119258236B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411620987.7,技术领域涉及:A61K47/69;该发明授权基于NK细胞膜修饰的多功能锰基杂化纳米平台及其制备方法和应用是由冯龙宝;郭瑞;文荣设计研发完成,并于2024-11-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本基于NK细胞膜修饰的多功能锰基杂化纳米平台及其制备方法和应用在说明书摘要公布了:本发明涉及基于NK细胞膜修饰的多功能锰基杂化纳米平台及其制备方法和应用,通过选择双硒键修饰的高分支树枝状聚合物PSeSeS作为载体,通过部分修饰mPEG和苯硼酸,提升水溶性和稳定性,还赋予了材料对肿瘤微环境中特定反应性。进一步利用PSeSeS的末端和叔胺基团还原高锰酸钾生成MnO₂纳米颗粒,缓解肿瘤低氧环境,增强光热疗法,同时还可产生活性氧。然后负载阿霉素和cGAMP,结合化疗与免疫治疗,提升免疫系统对肿瘤的识别和清除能力;进一步采用NK细胞膜修饰,提高靶向性和体内稳定性。本发明的纳米平台克服了现有技术中肿瘤微环境响应性差、靶向性弱、药物释放不精准及治疗方式单一等缺点,可显著提升肝癌治疗的效果和安全性。
本发明授权基于NK细胞膜修饰的多功能锰基杂化纳米平台及其制备方法和应用在权利要求书中公布了:1.基于NK细胞膜修饰的多功能锰基杂化纳米平台的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:1)超支化聚合物PSeSeS的制备1.1将2.50g硒代胱胺二盐酸盐溶于11mL纯水中得到溶液A,将3.30mL丙烯酰氯溶于3.30mL二氯甲烷得到溶液B,将1.76g氢氧化钠溶于4.40mL水中得到溶液C;在冰浴条件下将溶液B和溶液C交替逐滴加入溶液A中,并迅速搅拌,滴加完成后,撤去冰浴,将反应液置于室温下继续反应6h;待反应完成后,加入10倍体积的二氯甲烷对其进行萃取并用纯水清洗3次;最后,于45°C下旋转蒸发除去溶剂二氯甲烷,并真空干燥过夜得到白色粉末状CSeC产物;1.2在室温下配制纯水与甲醇的混合溶剂10mL,其中纯水和甲醇的体积比为13,并加入0.222g氯化钙,随后向其中继续加入0.64g步骤1.1得到的CSeC,并搅拌至完全溶解;再将160μL的哌嗪溶于300μL甲醇中并将其加入上述反应液中;随后,于50°C冷凝回流反应48h,再加入320μL哌嗪继续反应12h;反应完成后,收集产物并使用盐酸调节其pH至4-6,再于纯水中使用MWCO=1000的透析袋透析透析2天;冻干,得到最终白色絮状产物PSeSeS;1.3首先将步骤1.2得到的PSeSeS树枝状聚合物50mg溶于10mL水中,48.1mgmPEG-Mal溶于10mL水中,将两者混合在磁力搅拌下于30℃反应24小时;然后,使用MWCO为10000Da的透析袋将混合物用水透析3天,2L,9次,并冻干以获得PSeSeS-mPEG粉末,然后将取50mg获得的PSeSeS-mPEG粉末溶于10mLDMSO中,取11.7mgBr-PBA溶于5mLDMSO中,两者混合在磁力搅拌下在70℃水浴中反应24小时,使用MWCO为10000Da的透析袋将反应混合物用水透析3天,2L,9次,最后冻干得到SePP粉末;2)MSePPNPs的制备使用注射泵将含有8.0mgKMnO4的浓度为0.25mgmLKMnO4水溶液以1mLmin的速度加入到SePP树枝状聚合物溶液中,所述SePP树枝状聚合物溶液是通过将50mgSePP溶于10mL水中得到的,并在室温下磁力搅拌下反应1小时;之后,使用截留分子量为10000Da的透析袋将混合物对水透析1天,2L,三次,然后冻干得到MSePPNPs的深棕色粉末;3)NK细胞膜修饰首先,将NK细胞膜碎片在去离子水中混合均匀,然后按照加入ww=1:1MSePPNPs,使用Avanti脂质体挤出机将细胞膜碎片与MSePPNPs的混合物依次通过1μm,0.8μm,0.45μm孔径的聚碳酸酯滤膜共挤出;最后,将挤出的混合物8000rpm离心10分钟以收集得到NKCM@MSePP;4)DOX和cGAMP的负载室温下将制备得到的100mgNKCM@MSePP与20mgDOX在100μLPBS中混合30分钟,制备得到NKCM@MSePPDOX复合物,然后将得到的MSePPDOX复合物与3mgcGAMP在100μLPBS中混合30分钟,然后过滤得到NKCM@MSePPDOXcGAMP。
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