江苏省徐州环境监测中心甘志永获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏省徐州环境监测中心申请的专利一种同时检测环境水体中16种内分泌干扰物的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN119086743B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202411114310.6,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种同时检测环境水体中16种内分泌干扰物的方法是由甘志永;李艳荣;刘浩;郑新颖;周玉娇;宋吉祥;周萍;杜娟设计研发完成,并于2024-08-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种同时检测环境水体中16种内分泌干扰物的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种同时检测环境水体中16种内分泌干扰物的方法,属于环境检测领域。该方法包括:样品的采集和保存;样品预处理;标准曲线的建立;采用高效液相色谱‑串联质谱测定水样中内分泌干扰物的浓度。本发明可同时检测地表水、地下水、污水、海水等各类环境水体中痕量双酚A、4‑叔丁基苯酚、4‑丁基苯酚、4‑戊基苯酚、4‑己基苯酚、4‑叔辛基苯酚、4‑庚基苯酚、4‑壬基酚、4‑正辛基苯酚、4‑正壬基酚、雌三醇、己烯雌酚、17β‑雌二醇、17α‑乙炔雌二醇、雌酮、己烷雌酚16种内分泌干扰物,通过优化液相色谱流动相种类和氟化铵的浓度,提高了目标物的响应值,从而降低了检出限。
本发明授权一种同时检测环境水体中16种内分泌干扰物的方法在权利要求书中公布了:1.一种同时检测环境水体中16种内分泌干扰物的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一,样品的采集和保存用干净棕色玻璃瓶采集水样,并调节pH在1-2之间,4℃下避光保存;步骤二,样品预处理依次用5mL正己烷、5mL二氯甲烷、5mL甲醇和10mL实验用水活化HLB固相萃取小柱;将采集的全部样品,用量筒测量体积后,以10mLmin的流速通过固相萃取柱;上样结束后,用10mL甲醇依次荡洗量筒、样品瓶,加入30mL实验用水,继续上样固相萃取小柱,然后用10mL实验用水淋洗固相萃取柱;淋洗结束后用氮气吹干固相萃取柱,再以1mLmin~2mLmin的流速,依次用1.5mL甲醇和5mL二氯甲烷洗脱,分别收集甲醇洗脱液和二氯甲烷洗脱液至浓缩管中;35℃下将二氯甲烷洗脱液氮吹浓缩至0.3mL~0.4mL,然后转入甲醇洗脱液,并用甲醇分两次清洗浓缩管后一并转入;继续氮吹浓缩至0.5mL~0.8mL,加入内标使用液,用甲醇定容至1mL,涡旋混匀,通过玻璃纤维或者尼龙材质的0.22μm滤膜后装于棕色进样瓶,4℃保存,待测;步骤三,标准曲线的建立配制至少5个浓度点的标准工作溶液,双酚A、4-丁基苯酚、4-戊基苯酚、4-己基苯酚、4-叔辛基苯酚、4-庚基苯酚、4-正辛基苯酚、4-正壬基酚、雌三醇、己烯雌酚、17β-雌二醇、17α-乙炔雌二醇、雌酮、己烷雌酚的参考浓度分别为0.5μgL、1μgL、2μgL、4μgL、8μgL、20μgL、50μgL,4-叔丁基苯酚浓度为参考浓度为2.5μgL、5μgL、10μgL、20μgL、40μgL、100μgL、250μgL,4-壬基酚(异构体混合物)参考浓度分别为1μgL、2μgL、4μgL、8μgL、16μgL、40μgL、100μgL;内标浓度为20μgL,以目标化合物与对应内标的浓度比为横坐标,以其对应的峰面积与内标峰面积的比值为纵坐标,建立标准曲线;步骤四,采用高效液相色谱-串联质谱测定水样中内分泌干扰物的浓度,其中:液相色谱条件为:液相色谱柱:C18反相色谱柱,3.0mm*150mm,2.7μm;流动相A:0.1mmolL氟化铵水溶液;流动相B:0.1mmolL氟化铵甲醇溶液;流动相梯度洗脱程序:0min,40%流动相A,60%流动相B;4min,5%流动相A,95%流动相B;10min,5%流动相A,95%流动相B;10.10min,40%流动相A,60%流动相B;12min,40%流动相A,60%流动相B;运行时间:12min;流速:0.4mLmin;柱温:40℃;进样量:2μL;质谱条件为:离子源:电喷雾离子源ESI,负离子模式;监测方式:多反应监测MRM;干燥气温度:275℃;干燥气流量:6Lmin;鞘气温度:350℃;鞘气流量:11Lmin;雾化器压力:40psi;毛细管电压:3500V;在液相色谱溶剂混合泵和进样器之间加延迟柱以消除仪器系统本底干扰,所述延迟柱为填料粒径为5μm、柱长50mm、内径4.6mm的C18反相色谱柱。
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