恭喜内蒙古原生元生物科技有限公司武晓云获国家专利权
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龙图腾网恭喜内蒙古原生元生物科技有限公司申请的专利一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN107267454B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-05-23发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:201610214351.1,技术领域涉及:C12N5/0783;该发明授权一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用是由武晓云;刘学敏;康会彦;王云虹;樊晓翔;李志刚;丁炜;武立华;李金艳;沈殿富;张慧珍设计研发完成,并于2016-04-07向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用在说明书摘要公布了:本发明公开了一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用。本发明所提供的脐血NK细胞的体外扩增方法包括从分离的脐血单个核细胞活化培养和增殖培养脐血NK细胞的过程。与现有的分离及扩增脐血NK细胞的方法相比,本发明不需要细胞分选,不需要滋养层细胞,操作简单,通用性好,成本低,所用试剂不含动物源成分,安全性好,NK细胞产量高,获得的脐血NK细胞的纯度达90%以上,细胞总数可达1010‑11个份脐血,对肿瘤细胞的杀伤力高。本发明将在制备肿瘤免疫治疗药物及肿瘤免疫治疗中发挥作用。
本发明授权一种脐血NK细胞的体外扩增方法及其试剂盒与应用在权利要求书中公布了:1.一种脐血NK细胞的体外扩增方法,包括以下步骤:1活化培养脐血NK细胞:用淋巴细胞培养基调整脐血单个核细胞密度为0.5~5×106个mL,再添加1~10μgmL唑来膦酸和200~2000IUmL重组人白介素-2,且不对脐血NK细胞进行分选,或再添加1~10μgm唑来膦酸和200~2000IUmL重组人白介素-2、1~100ngmL重组人白介素-15和1~100ngmL重组人白介素-18,且不对脐血NK细胞进行分选,在36℃~40℃、5%CO2饱和湿度环境中培养1~5天,收集细胞液;所述淋巴细胞培养基为MediumCTSTM或GMPSXFMTM-CD细胞培养基;2增殖培养脐血NK细胞:从步骤1的细胞液中获取细胞,用GMPSXFMTM-CD淋巴细胞培养基调整细胞密度为0.5~5×106个mL,再添加200~2000IUmL重组人白介素-2,在36℃~38℃、5%CO2饱和湿度环境中培养,每隔2-3天补充新鲜培养基并调整细胞密度为0.5~5×106个mL,培养14~35天,收获得到脐血NK细胞。
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