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龙图腾网恭喜深圳华大基因科技服务有限公司申请的专利扩增或者检测含有全长poly(A)的全长转录组cDNA的方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN115181790B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-10发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202110368885.0，技术领域涉及：C12Q1/6869；该发明授权扩增或者检测含有全长poly(A)的全长转录组cDNA的方法是由唐冲;谢哲;陈智超;郭梅;瓮喆设计研发完成，并于2021-04-06向国家知识产权局提交的专利申请。

本扩增或者检测含有全长poly(A)的全长转录组cDNA的方法在说明书摘要公布了：本发明公开了一种扩增或者检测含有全长polyA的全长转录组cDNA的方法。所述方法包括：1单细胞反应制备；2末端延伸：以带PolydT的10×barcodedgelbeads为模板，使带polyA的转录本末端延伸得单链的产物1；3模板置换：对所述产物1进行反转录，在反转录产物后的3’末端添加3个碱基C；并添加TSO引物进行反应得产物2；4PCR扩增：对所述产物2进行PCR扩增。本发明提高了对单细胞全长转录组的建库通量，弥补了目前单细胞转录组检测不能检测全长polyA的技术空白。

本发明授权扩增或者检测含有全长poly(A)的全长转录组cDNA的方法在权利要求书中公布了：1.一种基于10Xgenomics单细胞平台扩增或者检测含有全长polyA的全长转录组cDNA的方法，其特征在于，所述方法包括：（1）单细胞反应制备；其包括a）制备单细胞悬液；b）配制Mastermix；c）将a）和b）混匀，得混匀液并制备液滴；其中所述Mastermix包括dNTP、无5’-3’外切酶活性的DNA聚合酶和缓冲液，所述缓冲液包括50mMNaCl、10mMTris-HCl、10mMMgCl2和1mMDTT；（2）末端延伸：以带PolydT的10×barcodedgelbeads为模板，使带polyA的转录本末端延伸得单链的产物1；（3）模板置换：对所述产物1进行反转录，在反转录产物后的3’末端添加3个碱基C；并添加TSO引物进行反应得产物2；（4）PCR扩增：对所述产物2进行PCR扩增；在步骤（3）之前对步骤（2）所得产物进行样品纯化和引物消化；所述引物消化包括：1）在纯化产物管内加入等量ExonucleaseI和RNase抑制剂，再加入10×NEBbuffer2放置在37℃反应；2）取1.8倍体积的室温RNACleanXPBeads加入PCR产物中并充分混匀，室温孵育；3）静置2-5min至液体澄清，弃掉上清；加入等倍体积的80%乙醇，室温静置后弃去上清；4）重复步骤3），弃上清并将管底液体尽量吸干；5）室温干燥，使磁珠表面无反光、无开裂；6）加入TE进行cDNA洗脱，移液器吹打混匀并室温下溶解；7）将离心管置于磁力架上，静置至液体澄清，将上清液转移到新离心管中。

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