买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

龙图腾网获悉江苏大学;成都大熊猫繁育研究基地申请的专利一种小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法获国家发明授权专利权，本发明授权专利权由国家知识产权局授予，授权公告号为：CN116024384B 。

龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉：该发明授权的专利申请号/专利号为：202211361469.9，技术领域涉及：C12Q1/70；该发明授权一种小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法是由张文;鲍思雯;刘颂蕊;茅庆庆;赵敏;李运莉;纪立凯;杨世兴;沈权;王晓春设计研发完成，并于2022-11-02向国家知识产权局提交的专利申请。

本一种小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法在说明书摘要公布了：本发明属于病毒检测技术领域，具体涉及一种小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法。本发明根据RPAVVP1的基因序列设计并合成特异性引物，构建重组质粒pcDNA3.1HA‑RPAV‑VP1，作为标准品建立标准曲线，构建针对小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测体系，实现RPAV的特异性检测。能够检测到101copiesμL的重组质粒。具有特异性和敏感性高、重复性好及耗时短的优点。检测结果可直接通过电脑软件读出，简化实验步骤节约检测时间。为检测小熊猫细小病毒提供了一种新的检测方法，弥补熊猫细小病毒检测的技术空白，为诊断小熊猫细小病毒感染提供依据，在保护小熊猫及大熊猫方面发挥重要作用。

本发明授权一种小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法在权利要求书中公布了：1.一种非诊断目的的检测小熊猫细小病毒的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： 1根据7条小熊猫细小病毒的VP1基因序列进行序列比对，根据结果选择病毒的保守序列区域设计特异性引物RPAV-VP1-PF和RPAV-VP1-PR，RPAV-QPF和RPAV-QPR；其核苷酸序列分别如SEQIDNO:1～SEQIDNO:4所示； 2以小熊猫细小病毒的DNA为模板，采用步骤1设计的特异性引物RPAV-VP1-PF和RPAV-VP1-PR进行PCR扩增获得目的基因VP1的DNA片段； 3将PCR扩增产物纯化，与酶切后线性化的质粒载体pcDNA3.1HA连接，转化到大肠杆菌感受态细胞中，挑取阳性克隆提取质粒，获得重组质粒pcDNA3.1HA-RPAV-VP1标准品； 4将重组质粒pcDNA3.1HA-RPAV-VP1进行10倍倍比稀释得到重组质粒标准品溶液，并以其为模板，采用特异性引物RPAV-QPF和RPAV-QPR进行SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR，以重组质粒标准品的拷贝数浓度的对数值为横坐标，Ct值为纵坐标，得到线性回归方程y＝-3.1557x+36.419，相关系数为0.9972； 5以待测样本的DNA为模板，采用特异性引物RPAV-QPF和RPAV-QPR进行SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR，并将获得的Ct值带入步骤4所构建的线性回归方程，实现待测样本中小熊猫细小病毒的实时荧光定量检测。

如需购买、转让、实施、许可或投资类似专利技术，可联系本专利的申请人或专利权人江苏大学;成都大熊猫繁育研究基地，其通讯地址为：212013 江苏省镇江市京口区学府路301号；或者联系龙图腾网官方客服，联系龙图腾网可拨打电话0551-65771310或微信搜索“龙图腾网”。