江苏创健医疗科技股份有限公司王丽萍获国家专利权
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龙图腾网获悉江苏创健医疗科技股份有限公司申请的专利酵母重组XVII型人源化胶原蛋白及其制备方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116375847B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-06-13发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211315576.8,技术领域涉及:C07K14/78;该发明授权酵母重组XVII型人源化胶原蛋白及其制备方法是由王丽萍;李佳佳;钱晨明;程鹏飞;刘慧敏;蒋雯雯;魏雪花;徐园;钱松;凡孝菊;李海航设计研发完成,并于2022-10-26向国家知识产权局提交的专利申请。
本酵母重组XVII型人源化胶原蛋白及其制备方法在说明书摘要公布了:本发明提供了一种酵母重组XVII型人源化胶原蛋白及其制备方法,尤其是表达XVII型胶原蛋白第15螺旋区的重组人源化胶原蛋白、重组工程菌及其制备方法,属于基因工程、合成生物学技术领域。本发明提供了XVII型胶原蛋白的第15螺旋区全长序列,并基于该序列进行氨基酸残基的突变得到突变体;本发明首次将XVII胶原蛋白的第15螺旋区的全长序列在毕赤酵母表达,建立了一整套的发酵工艺和纯化工艺,提高蛋白表达水平并减少降解,并通过实验验证了所得到的蛋白具有达到乃至超过天然人胶原的细胞粘附活性、促细胞迁移活性等生物学活性,能达到真正产品应用的目的,可以广泛应用于医药、医疗器械、生物材料、组织工程、化妆品等领域。
本发明授权酵母重组XVII型人源化胶原蛋白及其制备方法在权利要求书中公布了:1.一种提高重组XVII型人源化胶原蛋白生产水平且蛋白低降解的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: 1将重组工程菌接于种子培养基中,过夜培养制备菌种液;所述重组工程菌保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCCNo.21889、CGMCCNo.21888; 2设置发酵温度和pH值,将菌种液接种到发酵培养基中,调节搅拌转速、空气通量、罐压、DO值,培养至碳源耗尽,DO快速回升,开始流加补料培养基,至菌OD600值至一定值,停止流加补料培养基; 所述发酵培养基组分包括NH4H2PO411.9gL、KH2PO42.515gL、CaSO4·2H2O0.295gL、K2SO44.55gL、MgSO4·7H2O3.725gL、甘油20gL、PTM10.45mLL; 所述pH值设置为4.0; 当所述菌OD600值为50时,停止流加补料培养基; 3等甘油耗尽,DO≥70%后开始流加诱导培养基,进入甲醇诱导阶段,调节转速、通气量、罐压和流加速度使DO≥30%; 所述步骤3中诱导培养基组分包括:纯甲醇、50%甘油、PTM1;其中纯甲醇和50%甘油体积比为8:2,每升加入12mLPTM1; 4诱导发酵结束后,取发酵液上清,检测蛋白; 所述重组XVII型人源化胶原蛋白为表达XVII型胶原蛋白第15螺旋区的重组人源化胶原蛋白; 所述重组XVII型人源化胶原蛋白为SEQIDNO.2、SEQIDNO.4所示的氨基酸序列。
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