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申请/专利权人：深圳市人民医院
摘要：一种Piwi4基因沉默对PD模型神经影响的实验方法，通过siRNApool、化学修饰的ASOs、AAV介导的shRNA三种途径对第一实验组、第二实验组和第三实验组的小鼠进行Piwi4基因沉默，然后分别建立MPTP诱导的PD模型和6‑OHDA诱导的PD模型，其后分别通过免疫组化技术、qPCR技术和免疫印迹分析技术对对照组、第一实验组、第二实验组、第三实验组的样本进行分析，获得实验数据，利用SPSS等统计分析软件对数据进行分析验证，从而可用于验证Piwi4基因沉默对PD模型神经炎症和神经元存活的影响，从而可为改善PD、治疗PD提供一种全新的思路。
主权项：1.一种Piwi4基因沉默对PD模型神经影响的实验方法，其特征在于，其包括以下步骤：随机选取若干只成年小鼠，将其分成对照组、第一实验组、第二实验组和第三实验组；利用siRNApool、化学修饰的ASOs、AAV介导的shRNA三种途径分别靶向沉默第一实验组、第二实验组和第三实验组小鼠的Piwi4基因，其中，第一实验组采用siRNApool途径，第二实验组采用化学修饰的ASOs途径，第三实验组采用AAV介导的shRNA；使用药物诱导对照组、第一实验组、第二实验组和第三实验组中的小鼠建立PD模型；处死对照组、第一实验组、第二实验组和第三实验组中的部分PD模型，冰上取PD模型的的脑部，并制作出冷冻切片；分别对对照组、第一实验组、第二实验组和第三实验组的冷冻切片进行染色以评估小胶质细胞活化状态，并用TH免疫法评估黑质DA神经元的存活状态；将对照组、第一实验组、第二实验组和第三实验组中剩余PD模型的黑质从其脑部分离出来，其后从黑质中分离出神经胶质细胞，提取总RNA和蛋白质；通过qPCR和免疫印迹法分析Piwi4和炎症因子的表达。
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权利要求：
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