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申请/专利权人：大连海洋大学
摘要：本发明公开一种从海洋腹足类黏液中提取的抗肝癌和抗肝纤维化的低聚肽，是以成本低廉的海洋腹足类黏液为原料提取总蛋白，并以混合蛋白酶对所提取的总蛋白进行酶解，制备海洋腹足类粘液低聚肽。所制备的低聚肽在一定浓度范围内对人正常肝细胞无毒性（不会引起正常肝细胞损伤），对人肝癌细胞Hep‑G2和表型为活化型的大鼠肝星状细胞HSC‑T6的增殖均具有极显著的抑制作用，具有价格低廉、用量少、见效快等优点，可应用于制备抗肝癌和抗肝纤维化药物。
主权项：1.一种从海洋腹足类黏液中提取的抗肝癌和抗肝纤维化的低聚肽，其特征在于按照如下步骤制备：步骤1：收集海洋腹足类黏液；步骤2：分别提取所收集的海洋腹足类黏液的水溶性总蛋白和膜总蛋白，所述水溶性总蛋白的提取方法为：将黏液与纯水按照体积比为1：5~10于磁力搅拌器下4℃搅拌1~1.5h，10000rpm离心20min后取上清，即水溶性总蛋白，所述膜总蛋白的提取方法为将黏液与纯水按照体积比为1：5~10混匀后于冰浴中进行超声破碎，每超声破碎20s间隔10s，4个循环，10000rpm离心20min，弃上清后提取膜总蛋白；将膜总蛋白溶于含有终浓度为0.02%的TritonX-100水溶液中，得到膜总蛋白溶液；合并所提取的水溶性总蛋白和膜总蛋白溶液，即获得海洋腹足类黏液的总蛋白；步骤3：向所获得的海洋腹足类黏液总蛋白中加入混合蛋白酶，调节pH=7~8，30~50℃水浴2~3h后，置于100℃水浴中10min，获得酶解液；所述混合蛋白酶与海洋腹足类黏液总蛋白的质量体积比为10~50gL，所述混合蛋白酶为胰蛋白酶、复合风味蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶的酶活力单位之比为5：6：10：12；步骤4：将所获得的酶解液8000rpm，15min离心取上清，冷冻干燥上清至粉末状即可。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 大连海洋大学 从海洋腹足类黏液中提取的抗肝癌和抗肝纤维化的低聚肽
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