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一种天麻素与PEGA树脂共价偶联合成亲合层析树脂的方法及其应用 

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申请/专利权人:昆明理工大学

摘要:本发明公开一种天麻素与PEGA树脂共价偶联合成亲合层析树脂的方法及其应用,制备步骤包括:PEGA树脂的预处理、PEGA树脂的平衡、PEGA树脂的活化、PEGA树脂与反应催化物的结合、PEGA树脂与天麻素的共价偶联得到天麻素与PEGA树脂共价偶联亲合层析树脂;本发明制备得到的天麻素与PEGA树脂共价偶联亲合层析树脂可以运用于天麻素特异性结合分子靶点的筛选和鉴定,本发明步骤较少,操作简便,同时使用了新的反应催化剂,更加安全。

主权项:1.一种天麻素与PEGA树脂共价偶联合成亲合层析树脂的方法,其特征在于,具体步骤如下:(1)取300-500mgPEGA树脂,用pH8.0的Tris-HCL缓冲液1mL重悬,于小容量瓶中充分混合搅拌30分钟;(2)将预处理后的树脂用DMF重悬后转移至5mL玻璃柱料管中,静置待树脂全部沉降后,用pH8.0的Tris-HCL缓冲液过柱平衡树脂3次,每次2mL;(3)待平衡缓冲液流尽后,向柱料管中加入吡啶过柱冲洗柱料3次,每次2mL,然后用DMF将树脂从柱料管中重悬后移出至小型圆底反应瓶中;(4)向反应瓶中加入溴代乙酸乙酯至浓度达到0.088mmolL,并不断搅拌混合6小时后,用DMF将树脂重悬后转移至柱料管中,依次用二氯甲烷、甲醇、DMF分别过柱冲洗3次,每次3mL;(5)将PEGA树脂从柱料管中用DMF重悬后转移至反应瓶中,加入天麻素至终浓度为0.08mmolL,加入碳酸钾至终浓度为0.08mmolL,并不断搅拌混合,反应3天后移至柱料管中,得到天麻素与PEGA树脂共价偶联亲合层析树脂。

全文数据:

权利要求:

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