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申请/专利权人：中央大学校产学协力团

摘要：本发明的含有Lactococcuschungangensis作为有效成分的组合物在以下方面具有优异的效果：预防或治疗炎性疾病，抑制主要的炎症因子一氧化氮和前列腺素E2的分泌，抑制主要的过敏相关因子β‑己糖胺酶和组胺的分泌，以及显著抑制皮肤疾病相关的细胞因子和趋化因子的生成。这些效果和那些常规皮肤疾病治疗剂他克莫司在相同的水平上，甚至可与它们相匹敌，因此，该组合物可用作炎性疾病的预防或治疗剂。此外，本发明的组合物显示出对抗引起特应性皮炎的继发感染等的金黄色葡萄球菌的抗菌活性，因此可用于预防或治疗细菌感染。

主权项：1.一种用于治疗炎性疾病的药物组合物，其特征在于：含有登记号为KCTC12684BP的Lactococcuschungangensis作为有效成分。

全文数据：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分的用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物技术领域[0001]本发明涉及一种含有Lactococcuschungangensis作为有效成分的用于预防或治疗炎性疾病的药物组合物。具体而言，本发明的组合物抑制巨噬细胞释放一氧化氮和炎性细胞因子，并抑制肥大细胞表达组胺或诱发过敏的细胞因子，从而可用于治疗炎性疾病或过敏性疾病。此外，本发明的组合物表现出对抗引起特应性皮炎的继发感染等的微生物一一金黄色葡萄球菌的抗菌活性，因此可用于治疗细菌感染。背景技术[0002]本申请要求于2015年3月27日提交的韩国专利申请第10-2015-0043602号的优先权，其整体内容通过引用纳入本申请。[0003]传统上，炎症是针对由物理外伤、有害化学物质、微生物感染或体内代谢产物中的刺激物引起的组织损伤而局部显现的正常的保护性体内防御机制的表达。这样的炎症由从损伤组织和迀移细胞中产生的多种化学媒介因子所触发，已知这些化学媒介因子随着炎症过程的类型而变化。正常情况下，机体可通过炎症反应抵消或消除发病因素，并使损伤组织再生以恢复正常的结构和机能，但在非正常情况下，疾病状态如慢性炎症会继续发展。此夕卜，在由自身免疫反应--如无害物质（如花粉）、哮喘或风湿性关节炎--不适当地触发炎症的情况下，防御反应自身反而会损伤组织，因此需要用于预防或治疗炎性疾病的药剂。在几乎所有的临床疾病中可观察到炎症反应。在这些炎性疾病中，虽然一些是可通过抗生素治疗的细菌性疾病，但是大部分是由自身免疫反应引起的组织损伤导致的，因此是没有具体治疗方法的疑难病。[0004]用于治疗这样的炎性疾病的最常见的炎性疾病预防或治疗药剂主要分为留体类以及非留体类炎性疾病预防或治疗药剂，其中大部分合成的炎性疾病预防或治疗药剂具有除主要作用外伴随多种副作用的缺点。即，为了治疗炎性疾病，使用适当的用于预防或治疗炎性疾病的非甾体类药物非留体类抗炎药，NSAID来缓解炎症，当炎症严重或非甾体类抗炎药NSAID无效时，使用留体类，在难治疗的情况下，实施免疫抑制或手术疗法。此时使用的非留体类抗炎药NSAID主要通过抑制环氧合酶COX来抑制参与炎症反应的前列腺素的生成，从而显现预防或治疗炎性疾病的作用，但其具有引发胃肠障碍、肝障碍、肾脏机能障碍等的副作用而无法长时间使用的问题。[0005]另外，过敏是指宽范围的复杂病理现象的总和且是一种基于免疫反应的机体全身性或局部性障碍。人体中的过敏根据免疫机制分为I、II、III以及IV型，其中属于速发型过敏反应的I型过敏在临床中占据重要部分，并且特应性皮炎、特应性鼻炎、支气管哮喘、枯草热以及花粉症等均属于此。[0006]大约在1953年，已知I型过敏由肥大细胞的活化而引起，而且这种肥大细胞的颗粒中含有大量作为炎症反应媒介物的组胺。在发现发生过敏反应时从肥大细胞释放出组胺这一现象后，在对该机制进行研究时，Ishizaka发现了免疫球蛋白EIgE，这成为了证实肥大细胞参与速发型过敏反应的重要契机。也就是说，在肥大细胞的表面上具有IgE高亲和力受体，当IgE与该受体结合之后再与抗原结合从而形成交叉连接，诱导脱颗粒反应，进而同时释放作为颗粒内含物的组胺、血清素、缓激肽等，这些颗粒内含物作为预先形成的媒介物、蛋白酶和蛋白聚糖而被合成并贮存（Ishizaka，HospPract.;121:57-67，1977。[0007]I型过敏的特征在于存在随着肥大细胞的活化而释放出的作为颗粒内含物的活性胺类和蛋白酶、由细胞膜磷脂生成的脂质媒介物、细胞因子IL_3肥大细胞生长因子一一其已知为免疫反应的调节因子、IL_4、IL_5GalliSJetal.，CurrOpinImmunol·;，36:865-872,1991；BraddingPetal.JImmunol.,1517：3853-3865,1993〇[0008]此外，当皮肤暴露于过敏原时，抗原特异性IgE与存在于朗格汉斯细胞表面上的IgE受体结合，并将抗原呈递至T细胞表面而活化T细胞。在该情况中，不同于正常情况，在过敏性皮肤疾病、特别是在特应性皮炎的情况中，Th2被活化而释放IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10以及IL-13等的细胞因子，其结果是，促进B细胞产生IgE，并通过促进被活化的肥大细胞的脱颗粒而释放细胞因子和组胺。E.coli、鼠伤寒沙门氏菌Salmonellatyphimurium、金黄色葡萄球菌（StaphyIlococcusaureus、白念珠菌Candidaalbican、黑曲霉（Aspergillusniger或痤疮丙酸杆菌（Propionibacteriumacnes，优选可为金黄色葡萄球菌，但不限于此。[0093]另外，所述细菌感染可为细菌渗透患有特应性皮炎的患者的皮肤而使患者感染的情况，但不限于此。患有特应性皮炎的患者由于皮肤变得非常干燥且瘙痒，因此会持续进行抓挠，并由此在皮肤上产生伤痕。通过这样的伤痕，有害微生物如细菌和病毒侵入而导致继发感染，并引发炎症，严重时会伴随畏寒、发烧等症状。[0094]诱发这种特应性皮炎引起的继发感染的最常见的细菌为金黄色葡萄球菌。已知金黄色葡萄球菌只在5%的正常人中建群colonization，却在90%的特应性皮炎患者中建群（1^}^1611，兀，]\^^168，1^111111区1]111八]\1131'.]\〇61'1]11:〇1.90:525-530，1974。所述细菌通过释放毒素例如，肠毒素A、B、C以及D;中毒性休克综合征毒素而使特应性皮肤病患者的症状恶化和慢性化，并且由于大部分毒素在自然界中具有高抗原性，因此导致皮肤中的炎症反应加重（Leung，DYMetalJ_Clin.Invest.921374-80,1993。一项对儿童的特定研究表明疾病的严重性和产生毒素的菌株的建群相关联，并确认金黄色葡萄球菌在81%的患者中建群（对照组为4%Bunikowski，RetalJ.AllergyClinImmunol.1054:814-819,2000〇[0095]因此，对金黄色葡萄球菌显现出抗菌活性的本发明的组合物不仅能够改善特应性皮炎的症状，还可以预防或改善特应性皮炎引起的继发感染，这是尤为重要的。[0096]所述药物组合物、食品组合物、化妆品组合物以及皮肤外用制剂如上所述。[0097]本发明提供一种治疗炎性疾病的方法，其包括将有效量的Lactococcuschungangensis给予需要其的受试者。[0098]本发明提供Lactococcuschungangensis作为有效成分在制备用于治疗炎性疾病的药剂中的用途。[0099]本发明提供一种治疗细菌感染的方法，包括将有效量的Lactococcuschungangensis给予需要其的受试者。[0Ί00]本发明提供Lactococcuschungangensis作为有效成分在制备用于治疗细菌感染的药剂中的用途。[0101]本发明的所述“有效量”是指，当给予受试者时，可改善细菌感染或炎性疾病的量，其可包括治疗或实质上预防这样的疾病或改善其病症的量。所述“受试者”可以是动物，优选哺乳动物，特别是包括人类的动物，也可以是来自动物的细胞、组织、器官等。所述受试者可以是需要治疗的患者。[0102]发明的效果[0103]因此，本发明的含有Lactococcuschungangensis作为有效成分的组合物对于炎性疾病的预防或治疗具有优异的效果，并对主要的炎症因子一氧化氮和前列腺素E2的分泌具有显著的抑制效果，不仅对主要的过敏因子己糖胺酶和组胺的分泌具有显著的抑制效果，还显著抑制皮肤疾病相关的细胞因子和趋化因子的生成，因此可作为预防和治疗炎性疾病的药剂使用。此外，由于本发明的组合物显示出对抗诱发特应性皮炎的继发感染的金黄色葡萄球菌的抗菌作用，因此可用于预防或治疗细菌感染。附图说明[0104]图1示出了Lactococcuschungangensis的细胞毒性评价细胞生存能力检测）的结果。[0105]图2示出了采用Lactococcuschungangensis处理巨·细胞并测量一氧化氮生成量的结果。[0106]图3示出了采用Lactococcuschungangensis处理巨·细胞并测量前列腺素E2生成量的结果。[0107]图4A示出了采用Lactococcuschungangensis处理肥大细胞株HMC-I细胞并测量β-己糖胺酶分泌的结果。[0108]图4Β示出了采用Lactococcuschungangensis处理肥大细胞株HMC-I细胞并测量组胺分泌的结果。[0109]图5为显示BALBc小鼠皮肤损伤程度的图（正常:正常BALBc小鼠，DNCB:诱发了特应性的BALBc小鼠，皮肤涂布Lactocoecuschungangensis:皮肤涂布Lactocoecuschungangensis的诱发了特应性的BALBc小鼠，口服给予L.chungangensis:口服给予Lactococcuschungangensis的诱发了特应性的BALBc小鼠，他克莫司：皮肤涂布他克莫司的诱发了特应性的BALBc小鼠，在以下附图中均具有相同的含义）。[0110]图6为显示NCNga小鼠皮肤损伤程度的图。[0111]图7A示出了诱发了特应性的BALBc小鼠在10分钟内抓挠次数的测量值的结果。[0112]图7B示出了诱发了特应性的NCNga小鼠在10分钟内抓挠次数的测量值的结果。[0113]图8示出了将各动物组小鼠的背部皮肤组织和在耳朵中将表皮以及真皮进行HE染色并通过光学显微镜拍照的结果。[0114]图9示出了比较从各动物组小鼠的血液中分离的血清免疫球蛋白IgE生成量的结果。[0115]图IOA示出了采用PCR评价在各动物组小鼠的皮肤组织中的过敏相关的趋化因子和细胞因子11-4、11^-5、几-12、正1丫、了即-€[以及了六1?0的1111?熟表达量的结果。[0116]图IOB示出了采用PCR评价各动物组小鼠的皮肤组织中的过敏相关的趋化因子和细胞因子（11^-4、11^-5、几-12、正1丫、了陬-€[以及了六1?0的1111?嫩表达量的结果。[0117]图IlA示出了评价从各动物组小鼠的血液中分离的血清IL-4蛋白量的结果。[0118]图IlB示出了评价从各动物组小鼠的血液中分离的血清IL-5蛋白量的结果。[0119]图12A示出了从各动物组小鼠的血液中分离的血清IL-12蛋白量的结果。[0120]图12B示出了从各动物组小鼠的血液中分离的血清IFN-γ蛋白量的结果。[0121]图13A示出了从各动物组小鼠的血液中分离的血清TNF-α蛋白量的结果。[0122]图13B示出了从各动物组小鼠的血液中分离的血清TARC蛋白量的结果。具体实施方式[0123]以下对本发明进行详细地说明。[0124]但是，下述实施例仅例示本发明，本发明并不限于下述实施例。[0125]统计分析[0126]在所有实验结果中，实验组之间的统计分析采用单因素方差分析（one-wayAN0VA在P[0128]Lactococcuschungangensis的培养[0129]Lactococcuschungangensis是在本实验室从活性污泥气泡中分离出的菌株。该菌株保藏在韩国典型培养物保藏中心KCTC。将Lactococcuschungangensis接种到胰蛋白酶大豆液体培养基TSB:TrypticSoyBroth中，并在振荡培养箱中在30°C下培养24小时。使用全自动定量绘图酶标仪modelInfiniteF200,Tecan，Mannedorf，瑞士）测量各细胞密度。[0130]〈实施例2[0131]Lactococcuschungangensis对巨细胞和角质形成细胞的效果评价[0132]〈2-1Lactococcuschungangensis对RAW264.7细胞和HaCaT细胞的毒性评价[0133]测定在上述实施例1中培养的Lactococcuschungangensis的细胞毒性。将小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞和人体角质形成细胞株HaCaT细胞用于细胞毒性测定中，进行了细胞生存能力试验以测定细胞毒性。RAW264.7细胞和HaCaT细胞1周进行4-5次传代，培养基是含有20ml庆大霉素溶液和10%的胎牛血清FBS的DMEM培养基Dulbecco’sModifiedEagle’sMedium，并在37°C、5%C02的环境中培养。为了测定细胞生存能力，在24孔板中以IXIO5细胞孔的浓度培养RAW264.7细胞和HaCaT细胞，培养24小时。将Lactococcuschungangensis以IO9细胞ml的浓度在不含FBS的新鲜DMEM培养基中培养24小时。为了测量细胞株的生存率，使用MTT[3-4，5-二-甲基噻唑-2-基-2，5-二苯基四氮唑溴盐]试剂在全自动定量绘图酶标仪modelInfinite?200，16〇311，]\1，瑞士测量59〇1111]1处的吸光度。[0134]其结果，如在图1中所示，表明采用Lactococcuschungangensis处理过的RAW264·7细胞和HaCaT细胞的细胞生存能力与无处理组的细胞生存能力相当。[0135]Lactococcuschungangensis在RAW264·7细胞中的抗炎症活性测量[0136]测定上述实施例1中培养的Lactococcuschungangensis的抗炎症活性。和〈实施例2-1相同，将RAW264.7细胞用于抗炎症活性测定实验中。将所培养的细胞以IXIO5细胞孔的浓度置于24-孔板中，并培养24小时。为了诱发炎症，向不含FBS的新鲜DMEM培养基中添加LPS至浓度为0·lygml。采用Lactococcuschungangensis以IO9细胞ml的浓度处理细胞株之后培养24小时。24小时之后，为了从细胞培养上清液中测量细胞株的NO生成程度，以1:1的比例混合格里斯（Griess试剂并反应10分钟。在全自动定量绘图酶标仪（modelInfiniteF200，Tecan，M，瑞士）中测量540mm处的吸光度。此外，为了在细胞培养上清液中测量细胞株的PGE2生成程度，使用前列腺素E2参数tmS疫测定试剂盒（RDSystems，Minneapolis，MN，USA并根据手册进行实验。PGE2的蛋白量通过在全自动定量绘图酶标仪测量450mm处的吸光度而确定。[0137]其结果，如在图2和图3中所示，表明在以LPS刺激的RAW264.7细胞中，添加了Lactococcuschungangensis的细胞的NO生成量显著减少（图2，PGE2生成量也显示出相同的情况（图3。因此证实了Lactococcuschungangensis抑制炎症反应并具有抗炎症效果。本研究的结果表明Lactococcuschungangensis具有高的炎症治愈效能，Lactocoecuschungangensis可用于抗炎症组合物中，并且更广泛地，可用于治疗炎症的药物组合物中。[0138]〈实施例3[0139]Lactococcuschungangensis白勺体夕卜抗过敏效能i平价[0140]〈3_1由Lactococcuschungangensis引起的肥大细胞HMC-I的β-己糖胺酶分泌的比较[0141]β-己糖胺酶的分泌作为表示肥大细胞的活化和脱颗粒的主要因素而被广泛使用。因此，在本研究中，利用人体肥大细胞株HMC-I细胞来测量β-己糖胺酶的分泌。HMC-I细胞1周进行4-5次传代，培养基是含有20ygml庆大霉素溶液和10%胎牛血清的頂DMIscovesmodifiedDulbecccsMedium培养基，并在37°C、5%C〇2的环境中培养。将所述细胞以IXIO6细胞孔的浓度在24-孔板中培养，并将Lactococcuschungangensis以IXIO9细胞ml的浓度添加到台氏液（tyrode'sbuffer137mMNaCl，2.7mMKCl，1.8mMCaCl2，l.ImMMgCl2,11.9mMNaHCO3,0.4mMNaH2PO4，5.6mM葡萄糖，pH7.2中，并在37°C下培养30分钟。此后，以6ygml的浓度添加化合物4880并再次在37°C下培养30分钟。在采用冰终止反应10分钟后通过离心分离细胞，仅回收上清液，并将30μ1上清液转移到96孔板中，并添加30μ1ImM的4-ρ-硝基苯基-N-乙酰基-β-D-氨基葡萄糖苷作为基质，并在37°C下反应1小时。最后，采用120μ1停止液碳酸氢钠，pH10.2终止反应，然后在全自动定量绘图酶标仪中测量405mm处的吸光度。[0142]采用Lactococcuschungangensis处理HMC-I细胞之后，将采用化合物4880诱导脱颗粒而分泌的β-己糖胺酶的结果示于图4A中。如图4中所示，表明Lactococcuschungangensis对β-己糖胺酶的抑制效果显著，并抑制了65%的β-己糖胺酶分泌。[0143]〈3_2由Lactococcuschungangensis引起的肥大细胞HMC-I的组胺分泌的比较[0144]为了测定人体肥大细胞株HMC-I细胞分泌的组胺的浓度，培养HMC-I细胞，并以IXIO6细胞孔的浓度在24-孔板中培养24小时。培养后，通过与上述实施例3-1相同的方式采用Lactococcuschungangensis以IXIO9细胞ml的浓度处理所述细胞并培养1小时。将细胞采用化合物488010ygml处理20分钟，并回收细胞培养液。通过使用组胺测定ELISA试剂盒（CaymanChemicalCompany;AnnArbor，IL，USA在全自动定量绘图酶标仪中测量450mm处的吸光度而确定细胞培养液中的组胺浓度。[0145]采用Lactococcuschungangensis处理之后，将采用化合物4880诱导HMC-1细胞分泌组胺并将组胺分泌量的结果示于图4B。如图4B中所示，Lactococcuschungangensis显示出81%的高的组胺分泌抑制效果。所以，可知Lactococcuschungangensis对过敏显示出高的治愈效能。因此，本研究的结果是Lactococcuschungangensis显示出对过敏的高的治愈效能，Lactococcuschungangensis可用于抗过敏组合物，并且更广泛地，可用于治疗过敏的药物组合物中。[0146]〈实施例4[0147]Lactococcuschungangensis对诱发了特应性的BALBc小鼠和NCNga小鼠模型的体内效能评价[0148]〈4-1特应性的诱发以及药物处理[0149]将小鼠分成未处理组（正常）、DNCB组、他克莫司皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis口腔给药组总共5个组，每组各利用10只BALBc小鼠和NCNga小鼠进行评价。在BALBc小鼠和NCNga小鼠的背部和颈部涂布〇.Ig脱毛膏，并以柔软的绵纸以不会产生伤口的方式进行脱毛。放置5天，使微小伤愈合之后，以每周3次持续2周将1%的DNCB200丙酮:橄榄油=3:1涂布在背部和耳部来诱发特应性。诱发特应性之后每周2次持续4周将Lactococcuschungangensis以IO9细胞小鼠的量涂布在患部，并每周2次持续4周将Lactococcuschungangensis以IO9细胞小鼠的量经口给药小鼠。为了比较效能，使用他克莫司作为特应性的治疗剂。以l〇〇mgkg的量每周2次持续4周将他克莫司涂布在特应性患部。[0150]〈4-2诱发了特应性的BALBc小鼠和NCNga小鼠的肉眼评价[0151]为了评价他克莫司皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis口腔给药组的治疗效果，进行了肉眼评价。肉眼评价将红斑出血、干燥结瘢结瘢、水肿、糜烂抓痕程度作为评价指标而将皮肤状况分为4个等级0=不存在，1=轻度，2=中度，3=严重来评价，12分以上判断为特应性症状达到最高。将其结果示于下表中，BALBc小鼠的情况示于下表1至表5中，NCNga小鼠的情况示于下表5至表6中。[0152]此外，测量BALBc小鼠和NCNga小鼠的抓挠次数，并示于图7A和图7B中。[0153]【表1】[0154]正常BALBc小鼠的肉眼评价结果[0155][0156]【表2】[0157]DNCB诱发了特应性的BALBc小鼠的肉眼评价结果[0160]【表3】[0161]DNCB诱发了特应性之后采用特应性治疗剂他克莫司）皮肤涂布处理的BALBc小鼠的肉眼评价结果[0162][0163]【表4】[0164]DNCB诱发了特应性之后采用Lactococcuschungangensis皮肤涂布处理的BALBc小鼠的肉眼评价结果[0167]【表5】[0168]DNCB诱发了特应性之后采用Lactococcuschungangensis口服给药处理的BALBc小鼠的肉眼评价结果[0169][0170]【表6】[0171]正常NCNga小鼠的肉眼评价结果[0174]【表7】[0175]DNCB诱发了特应性的NCNga小鼠的肉眼评价结果[0176][0177]【表8】[0178]DNCB诱发了特应性之后采用特应性治疗剂他克莫司）皮肤涂布处理的NCNga小鼠的肉眼评价结果[0181]【表9】[0182]DNCB诱发了特应性之后采用Lactococcuschungangensis皮肤涂布处理的NCNga小鼠的肉眼评价结果[0183][0184]【表10】[0185]DNCB诱发了特应性之后采用Lactococcuschungangensis口服给药处理的NCNga小鼠的肉眼评价结果[0188]通过采用DNCB处理2周（图3的0-2周）对BALBc小鼠诱发了特应性之后，对采用100mgkg特应性治疗剂他克莫司涂布患部的组、采用IO9细胞小鼠的Lactococcuschungangensis涂布患部的组、采用IO9细胞小鼠的Lactococcuschungangensis口服·给药的组，肉眼观察皮肤损伤状况的结果示于图5以及上述表1-表5中。诱发了特应性皮炎的皮肤出现皮肤干燥引起的角质、整体性的红斑、渗出性痂形成和出血、水肿等各种症状，从他克莫司皮肤涂布组和Lactococcuschungangensis口服给药组观察到皮肤状况明显变好。相反，Lactococcuschungangensis皮肤涂布组虽然相对于Lactococcuschungangensis口服给药组较缓慢，但还是在肉眼观察时观察到皮肤状况慢慢变好的情况。这样的现象在BALBc小鼠抓烧次数评价中也显示出类似的倾向，特别地，Lact〇c〇ccuschungangensis口服给药组与他克莫司处理组以相同的程度显著地减少抓烧。NCNga小鼠也同样，通过DNCB处理2周（图3的0-2周诱发特应性之后，以相同方式对采用100mgkg特应性治疗剂他克莫司涂布患部的组、采用IO9细胞小鼠的Lactococcuschungangensis涂布患部的组、采用IO9细胞小鼠的Lactococcuschungangensis口服给药的组，肉眼观察皮肤损伤状况的结果示于图6以及上述表6-表10中。在NCNga小鼠上也同样观察到皮肤角质和红斑、渗出性痂形成和出血、水肿等多种症状，采用实验物质处理后显示出比BALBc小鼠更迅速的治愈能力。总之，可知BALBc小鼠和NCNga小鼠的Lactococcuschungangensis口服给药组对DNCB处理引起的皮肤损伤，显示出高的治愈效能。[0189]〈4-3组织病理学检查[0190]实验物质处理之后，摘取实验组以及对照组BALBc小鼠和NCNga小鼠的背部组织1.5X1.5cm和耳朵，并在10%多聚甲醛中固定24小时之后，将上述组织充分固定在石蜡上，之后切成5片而制备玻璃载片。采用苏木精伊红HE以公知的方法进行染色，并利用光学显微镜观察表皮和真皮的厚度，并将其结果示于图8中。[0191]如图8中所示，在DNCB诱发了特应性的BALBc小鼠和NCNga小鼠的表皮上观察到角质脱落、表皮肥厚、角化过度症。相反，在特应性治疗剂他克莫司皮肤涂布组和Lactococcuschungangensis口服给药组的BALBc小鼠和NCNga小鼠中观察到经过处理后，角质脱落、表皮肥厚和角化过度症均减轻，并且同样在Lactococcuschungangensis皮肤涂布组中观察到，相对于DNCB诱发了特应性的小鼠，经过处理后角质脱落、表皮肥厚、角化过度症稍微减轻。[0192]〈4-4免疫球蛋白IgE的测量[0193]实验物质处理之后，处死五个组的BALBc小鼠和NCNga小鼠并从心脏中采集血液，从中分离血清并测量IgE。具体而言，使用IgEELISA试剂盒（BDBiosciences，SanDiego，CA，将抗体在缓冲溶液中稀释并使之附着在96孔板上，在4°C下静置过夜，并根据手册进行试验。通过在全自动定量绘图酶标仪中测量450nm处的吸光度而测定IgE的蛋白量。[0194]通过使用IgEELISA试剂盒在从各BALBc小鼠和NCNga小鼠的心脏采集的血液分离出的血清中测量的介导特应性疾病的IgE的量的结果示于图9中。实验物质处理过的BALBc小鼠和NCNga小鼠的IgE量的结果表明，在他克莫司皮肤涂布组和Lact〇c〇ccuschungangensis口服给药组中以高水准抑制了IgE的生成。在BALBc小鼠中，与DNCB诱发组相比，他克莫司皮肤涂布组抑制了48%，Lactococcuschungangensis口服给药组抑制了49%。此外，在Lactococcuschungangensis皮肤涂布组中也显示了25%左右的低水准的抑制。此外，在NCNga小鼠中，与DNCB诱发组相比，他克莫司皮肤涂布组抑制了62%，Lactococcuschungangensis口服给药组抑制了58%，Lactococcuschungangensis皮肤涂布组抑制了30%。上述结果显示，Lactococcuschungangensis对于特应性疾病是有效的。[0195]〈4-5趋化因子和细胞因子的测量[0196]在实验物质处理之后，处死BALBc小鼠和NCNga小鼠，从DNCB诱发了特应性的对照组小鼠、他克莫司皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis口服给药组、Lactococcuschungangensis皮肤涂布组的BALBc小鼠和NCNga小鼠中摘取皮肤组织，然后加入裂解液Trizol，并用匀浆器进行粉碎直至溶解，并从粉碎的组织中提取RNA。具体而言，向从上述各对照组和实验组的BALBc小鼠和NCNga小鼠中摘取的皮肤组织中加入裂解液，并加入氯仿CHCl3，混合之后，放置10分钟，之后进行离心分离。回收离心分离的上清液并与等量的2-丙醇混合之后放置10分钟。再次对其进行离心分离，并采用80%的乙醇洗涤，干燥后获得RNA。通过逆转录PCR使用AMV逆转录酶、dNTPPromega，Madison，WI和EXTaqDNA聚合酶TakaraShuzou，日本东京获得cDNA，分析所得cDNA以确认特应性相关趋化因子和细胞因子的mRNA表达量。具体而言，利用下表5中对各IL-4、IL-5、IL-12、IFN-γ、TNF-a、TARC细胞因子和趋化因子以及作为对照的GAPDH所描述的引物对进行PCR。所述PCR反应在94°C下1分钟、95°C下30秒、55-65Γ下30秒以及70°C下3分钟的条件下反复30个循环。在如上所述的PCR反应之后，利用1.5%琼脂糖凝胶电泳法分析反应物，并利用GelD〇C™XR+Bio-Rad，Hercules，CA，USA进行成像，其结果示于图IOA和IOB中。在所述PCR中所使用的引物由Macrogen公司制备并使用。下表11是用于逆转录PCR中的引物的碱基序列。[0197]此外，从各BALBc小鼠和NCNga小鼠的心脏采集的血液中分离出的血清中的11^-4、IL-5、IL-12、IFN-γ、TNF-a和TARC蛋白质变化分别通过使用IL-4Quantikine免疫测定试剂盒、IL-5Quantikine免疫测定试剂盒、IL-12Quantikine免疫测定试剂盒、TNF-aQuantikine免疫测定试剂盒、CCL17TARCQuantikine免疫测定试剂盒（RDSystems，Minneapolis，MN，USA在全自动定量绘图酶标仪中测量450nm处的吸光度而确定。[0198]【表11】[0199]在PCR中所使用的引物的碱基序列[0200][0201][0202]将DNCB诱发了特应性的对照组、他克莫司皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis皮肤涂布组、Lactococcuschungangensis口服给药组的BALBc小鼠和NCNga小鼠处死，摘取组织，从中提取RNA以证实各趋化因子和细胞因子特异性引物。结果发现，相对于DNCB诱发了特应性的小鼠，他克莫司皮肤涂布组小鼠、Lactococcuschungangensis口服给药组小鼠的IL-4、IL-5、IL-12、IFN-γ、TNF-a和TARC的mRNA表达量均减少图10。[0203]此外，通过ELISA试剂盒测量从BALBc小鼠和NCNga小鼠的心脏采集的血液中分离出的血清中介导特应性疾病的趋化因子和细胞因子的量，结果在蛋白质水平上证实了，相对于DNCB诱发了特应性的小鼠，他克莫司皮肤涂布组小鼠、Lactococcuschungangensis口服给药组小鼠的IL-4、IL-5、IL-12、IFN-γ、TNF-a和TARC的mRNA表达量显著减少（图11至图13。还在蛋白质水平上证实了Lactococcuschungangensis皮肤涂布组小鼠的11^-4、11^_5、IL-12、IFN-γ、TNF-a和TARC的mRNA表达量稍微减少。因此，本发明的Lactococcuschungangensis能够以与他克莫司相同的程度治疗特应性，并且更广泛地，提示Lactococcuschungangensis可用于治疗特应性的药物组合物中。[0204]〈实施例5[0205]Lactococcuschungangensis对抗诱发特应性继发感染的微生物金黄色葡萄球菌的抗菌活性[0206]〈5-1实验微生物的制备[0207]将Lactococcuschungangensis使用膜蛋白酶大豆液体培养基（TSB在30°C培养箱中培养24小时，然后用于抗菌活性检测。实验中使用了从作为公知保藏机构的国家病原体培养物保藏中心NationalCultureCollectionforPathogens，NCCP获取的金黄色葡萄球菌NCCP14780StaphylococcusaureusNCCP14780〇[0208]Lactococcuschungangensis对抗诱发特应性继发感染的微生物金黄色葡萄球菌的抗菌活性测量[0209]将Lactococcuschungangensis在30°C培养箱中培养24小时以测量其抗菌活性。将金黄色葡萄球菌在脑心浸液BHI培养基中在37°C培养箱中培养24小时。将所培养的Lactococcuschungangensis转移到另一个胰蛋白酶大豆液体培养基之后，将所培养的葡萄球菌属细菌调节至每个培养皿的菌数为5X107,并加入7ml、60°C的未凝固的脑心浸液琼脂培养基，凝固后，在30°C培养箱中培养24小时。培养后，确认所生成的细菌的低生长区，即无菌区Clearzone，并使用游标卡尺测量直径，其结果示于表12中。[0210]【表12】[0211]Lactococcuschungangensis的抗菌活性测量[0212][0213]如表12中所示，证实了Lactococcuschungangensis对葡萄球菌属细菌显示出抗菌性。因此，由于Lactococcuschungangensis可保护机体避免葡萄球菌属细菌引起的特应性继发感染，并且其比抗菌剂更安全，因此，其可用于治疗特应性的药物组合物中。[0214]〈制备例1_5]皮肤外用制剂的制备[0216]〈1-1软膏的制备[0217]根据本领域中通常使用的方法通过混合下述制剂材料而制备软膏。[0220]〈1-2乳液的制备[0221]根据本领域中通常使用的方法通过混合下述制剂材料而制备乳液。[0223]〈制备例2[0224]食品组合物的制备[0225]〈2-1发酵乳的制备[0226]利用本发明的Lactococcuschungangensis制备发酵乳。[0227]通过将生乳（74.41%和脱脂乳（6.45%混合并向其中加入培养种菌和Lactococcuschungangensis进行培养而制备培养液（Lactococcuschungangensis：IX109CFUml。将在相同混合液组分中只加入培养种菌并进行培养所得的培养液作为对比实施例。制备糖液并与之前所制备的各培养液混合而制备发酵乳制品。[0228]〈2-2饮料的制备[0230]使用以上述组分及含量通过常规方法制备饮料。[0231]〈2-3健康功能食品粉剂的制备[0232]Lactococcuschungangensis冷冻干燥粉末（IX109CFUg20mg[0233]乳糖IOOmg[0234]滑石l〇mg。[0235]将上述成分混合并填充到气密布中来制备粉剂。[0236]〈2-4健康功能食品（片剂的制备[0238]将上述成分混合并通过片剂的常规制备方法进行制备。[0239]〈2-5健康功能食品胶囊剂的制备[0242]根据胶囊剂的常规制备方法将上述成分混合并填充到明胶胶囊中而制备胶囊剂。[0243]〈2-6健康功能食品混合粉剂的制备⑴[0245]〈2-7健康功能食品混合粉剂的制备⑵[0248]尽管上述维生素和矿物质混合物的配比相对地适合作为健康功能食品的优选实施例，但是可任意地改变所述配比，并可根据健康功能食品组合物的常规制备方法将所述成分混合之后制成颗粒。[0249]综上所述，本发明所属技术领域的技术人员可知晓本发明在不改变其精神或必要技术特征的前提下，可体现为其他具体实施形式。对此，上述实施例仅为例示性的，并不限制本发明。本发明的范围和上述详细说明应该由后面所附的权利要求书来定义。此外应理解，从其相同概念中导出的所有改变或变形的形式皆属于本发明的范围内。[0250]【工业适用性】[0251]本发明的含有Lactococcuschungangensis作为有效成分的组合物对炎性疾病具有优异的预防或治疗效果，并对主要的炎症因子一氧化氮和前列腺素E2的分泌具有显著的抑制效果，不仅对主要的过敏因子的己糖胺酶和组胺的分泌具有显著的抑制效果，还显著地抑制皮肤疾病相关的细胞因子和趋化因子的生成，这些效果与公知的皮肤疾病治疗剂他克莫司）的效果处于相同的水平。此外，本发明的组合物对诱发特应性皮炎的继发感染的金黄色葡萄球菌具有抗菌作用，因此具有高的工业适用性。

权利要求：1.一种用于治疗炎性疾病的药物组合物，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。2.根据权利要求1的组合物，其特征在于：所述Lactococcuschungangensis的登记号为KCTC12684BP。3.根据权利要求1或2的组合物，其特征在于：所述炎性疾病选自以下中的任何一种:炎性皮肤疾病、过敏性疾病、炎性肠病如克罗恩病和溃疡性结肠炎、腹膜炎、骨髓炎、蜂窝组织炎、脑膜炎、脑炎、胰腺炎、创伤引起的休克、支气管哮喘、囊性纤维化、中风、急性支气管炎、慢性支气管炎、急性支气管炎、慢性支气管炎、骨关节炎、痛风、脊柱关节病、强直性脊柱炎、赖特综合征、银肩病性关节病、肠病性关节炎、青少年关节炎、青少年强直性脊柱炎、反应性关节炎、感染性关节炎、后-感染性关节炎、淋菌性关节炎、结核性关节炎、病毒性关节炎、真菌性关节炎、梅毒性关节炎、莱姆病、“血管炎综合症”相关的关节炎、结节性多动脉炎、过敏性血管炎、卢伽雷氏肉芽肿症、风湿性多肌痛、关节细胞动脉炎、钙晶体沉积关节病、假性痛风、非-关节性风湿病、滑囊炎、腱鞘炎、上髁炎（网球肘）、神经性关节病、出血性关节病、过敏性紫癜、肥大性骨关节病、多中心性网状组织细胞瘤、肉状瘤病、血色素沉着症、镰状细胞病以及其他血红蛋白病、高脂蛋白血症、低丙种球蛋白血症、家族性地中海热、贝赫切特综合征、全身性红斑、回归热、银肩病、多发性硬化症、败血症、败血性休克、多器官功能障碍综合征、急性呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺疾病、急性肺损伤以及支气管肺发育不良。4.根据权利要求3的组合物，其特征在于：所述过敏性疾病为选自以下中的任何一种:过敏性皮肤病、特应性皮炎、支气管哮喘、过敏性鼻炎、过敏性结膜炎、过敏性中耳炎、荨麻疹、哮喘以及过敏性休克。5.—种用于治疗炎性疾病的食品组合物，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。6.—种用于治疗炎性疾病的化妆品组合物，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。7.—种用于治疗炎性疾病的皮肤外用制剂，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。8.—种用于治疗细菌感染的药物组合物，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。9.一种用于治疗细菌感染的食品组合物，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。10.—种用于治疗细菌感染的化妆品组合物，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。11.一种用于治疗细菌感染的皮肤外用制剂，其特征在于：含有Lactococcuschungangensis作为有效成分。12.—种治疗炎性疾病的方法，其特征在于：将有效量的Lactococcuschungangensis给予需要其的受试者。13.Lactococcuschungangensis作为有效成分在制备用于治疗炎性疾病的药剂中的用途。14.一种治疗细菌感染的方法，其特征在于：将有效量的Lactococcuschungangensis给予需要其的受试者。15.Lactococcuschungangensis作为有效成分在制备用于治疗细菌感染的药剂中的用途。

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