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产生苄基异喹啉生物碱(BIA)前体的微生物以及制备和使用所述前体的方法 

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申请/专利权人:小利兰·斯坦福大学托管委员会

摘要:提供工程化为产生苄基异喹啉生物碱BIA前体如去甲乌药碱NC和全去甲劳丹碱NL的宿主细胞。所述宿主细胞可具有一种或多种选自以下的工程化的修饰:酶基因中的反馈抑制减轻突变;生物合成酶基因的转录调节修饰;酶中的失活突变;以及异源编码序列。还提供适用于本发明方法中的使用所述宿主细胞和组合物例如试剂盒、系统等产生目标BIA或其前体的方法。

主权项:1.一种制备为前体苄基异喹啉生物碱产物的代谢物的方法,所述方法包括:用原料培养工程化的酵母细胞,所述工程化的酵母细胞包含编码序列修饰,其中所述编码序列修饰包括编码酶的异源编码序列、酶基因中的反馈抑制减轻突变、酶中的失活突变以及生物合成酶基因的转录调节修饰,其中所述酶参与产生所述前体苄基异喹啉生物碱产物的代谢途径,其中所述前体苄基异喹啉生物碱产物选自由以下组成的组:4-羟基苯乙醛、4-羟基苯丙酮酸、L-3,4-二羟基苯丙氨酸、3,4-二羟基苯乙醛、多巴胺、去甲乌药碱以及全去甲劳丹碱,其中所述编码酶的异源编码序列编码选自一种或多种如下的酶:TYR、TyrH、FOL2、PTPS、SepR、PCD、QDHPR、DODC、TYDC、MAO、NCS、6OMT、CNMT和4’OMT;所述酶基因中的反馈抑制减轻突变影响一种或多种选自ARO4和ARO7的酶基因;所述酶中的失活突变涉及ZWF1的失活;以及所述生物合成酶基因的转录调节修饰增加一种或多种选自ARO10和TKL1的酶基因的表达。

全文数据:

权利要求:

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