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用于检测蜜源植物的组合物、试剂盒、检测方法及应用 

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申请/专利权人:铜仁市林业科学院

摘要:本发明属于生物技术领域,公开了一种用于检测蜜源植物的组合物,所述组合物制备包括实时荧光PCR反应的反应体系总体积25μL,荧光PCR预混液2×Mix12.5μL,模板DNA3μL,引物对各1μL、探针10μmolL0.5μL和ddH2O7μL。扩增程序为,95℃预变性5min;95℃变性15s,60℃退火60s,共进行50个循环,每个循环结束后收集荧光信号,CT≤45为阳性。本发明的实时荧光PCR检测方法可采用完全闭管检测,无需PCR后处理,避免了交叉污染和假阳性。本发明的方法巧妙地运用了PCR技术的DNA高效扩增、核酸杂交的特异性和荧光检测技术的快速和敏感性,具有操作简单、省时省力、结果可靠和准确灵敏等优点。使用本发明的实时荧光PCR检测方法,其简单、快速、特异且灵敏的特点适合用于国内外市场上蜂蜜蜜源植物的检测。

主权项:1.一种用于检测蜜源植物的组合物,其特征在于,所述组合物制备包括实时荧光PCR反应的反应体系总体积25μL,荧光PCR预混液2×Mix12.5μL,模板DNA3μL,引物对各10μmolL各1μL、探针10μmolL0.5μL和ddH2O7μL。扩增程序为,95℃预变性5min;95℃变性15s,60℃退火60s,共进行50个循环,每个循环结束后收集荧光信号,CT≤45为阳性。所述组合物包含以下1至4中的引物和探针序列:1油菜特异性寡核苷酸引物对SEQIDNo.1和SEQIDNo.2以及探针SEQIDNo.3序列;2洋槐特异性寡核苷酸引物对SEQIDNo.4和SEQIDNo.5以及探针SEQIDNo.6序列;3荔枝和龙眼特异性寡核苷酸引物对SEQIDNo.7和SEQIDNo.8以及探针SEQIDNo.9序列;4龙眼特异性寡核苷酸引物对SEQIDNo.10和SEQIDNo.11以及探针SEQIDNo.12序列。

全文数据:

权利要求:

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