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申请/专利权人：江南大学
申请日：2023-02-08
公开（公告）日：2023-04-18
公开（公告）号：CN115975901A
主分类号：C12N1/21
分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12N15/61;C12N15/54;C12N15/53;C12P17/16;C12R1/19
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2023.05.05#实质审查的生效;2023.04.18#公开
摘要：本发明涉及工程大肠杆菌合成牡荆素和荭草苷的应用，属于生物工程技术领域。本发明构建了一株能充足供应糖基供体UDPG的菌株，通过使用CRISPR‑Cas9系统敲除糖酵解途径关键基因pgi和zwf，以及敲除了UDPG合成路径的旁路基因ugd，gcd和otsA；使用pETDuet‑1质粒过量表达大肠杆菌内源的UDPG关键基因磷酸葡萄糖变位酶基因pgm和UTP‑葡萄糖‑1‑磷酸尿苷酸转移酶galU，并使用pACYCDuet质粒游离表达UDP尿苷激酶ndk，构建一株能充足供应UDPG菌株，并在此菌株的基础上表达金莲花来源的8位碳苷糖基转移酶TcCGT1，以黄酮或其他类黄酮为底物用于合成糖基产物，在本发明中以木犀草素、芹菜素为例进行糖基产物牡荆素和荭草苷的发酵生产，最终，在5L发酵罐中牡荆素和荭草苷的产量分别达到17.25gL和36.52gL。
主权项：1.一株构建高产尿苷二磷酸葡萄糖的工程菌，其特征在于，所述工程菌以大肠杆菌为宿主，敲除或抑制基因组上糖酵解途径关键基因以及UDPG合成路径的旁路基因，游离表达磷酸葡萄糖变位酶、UTP-葡萄糖-1-磷酸尿苷酸转移酶和UDP尿苷激酶；所述糖酵解途径关键基因包括6-磷酸葡萄糖异构酶编码基因pgi和或6-磷酸葡萄糖1-脱氢酶编码基因zwf；所述UDPG合成路径的旁路基因包括UDP-葡萄糖6-脱氢酶编码基因ugd，葡萄糖脱氢酶编码基因gcd和或海藻糖-6-磷酸合酶编码基因otsA。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 工程大肠杆菌合成牡荆素和荭草苷的应用
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