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申请/专利权人：中国科学院水生生物研究所

摘要：本发明提供一种规模化获得XXXY性别决定的伪雄鱼亲本的育种方法及应用。该方法通过利用CRISPRCas9系统特异性切割鱼类的cyp17a1基因，获得有效突变的F1代cyp17a1杂合子鱼cyp17a1+‑，并进行自交，通过性别标记筛选出XX性别遗传型的cyp17a1纯合子cyp17a1‑‑XX的伪雄鱼，并将其与杂合子雌鱼cyp17a1+‑XX进行杂交，获得群体中伪雄鱼cyp17a1‑‑XX数量占比高达50％，从而达到大规模扩大伪雄鱼亲本种群数量的效果。本发明提供的育种方法有效实现了伪雄鱼种群数量扩繁和简易筛选，提升了性别决定控制育种的生产效率，为后续获得全雌鱼提供更多后备亲本。该方法具有很强的应用性，在水产养殖经济鱼类中有广泛的适应性和扩展性，大大扩展了该方法在鱼类性别决定育种领域中的应用范围。

主权项：1.一种规模化获得XXXY性别决定的伪雄鱼亲本的育种方法，其特征在于：所述规模化获得XXXY性别决定的伪雄鱼亲本的育种方法采用基因编辑技术敲除鱼类的性类固醇激素合成通路的催化酶编码基因，用以阻断鱼类的性类固醇激素合成通路，并筛选获得有效突变的杂合子雌鱼和XX性别遗传型的伪雄鱼，再将所述伪雄鱼与所述杂合子雌鱼进行杂交，由此得到高伪雄群体，规模化扩大伪雄鱼亲本种群的数量；所述性类固醇激素合成通路的催化酶编码基因为cyp17a1催化酶编码基因；包括如下步骤：S1，利用基因编辑技术敲除鱼类中的cyp17a1基因，获得F0代；S2，将F0代雄鱼与野生型雌鱼进行杂交，获得有效突变的F1代cyp17a1杂合子鱼，其基因型为cyp17a1+-；S3，将所述F1代cyp17a1杂合子鱼进行自交，获得F2代；S4，在所述F2代中，筛选无雄性标记的、XX性别遗传型的cyp17a1纯合子鱼，其表现为生理雄性，记为伪雄鱼，基因型为cyp17a1--XX；S5，将基因型为cyp17a1+-XX的杂合子雌鱼和基因型为cyp17a1--XX的所述伪雄鱼进行杂交；S6，经过人工催产和授精后获得F3代高伪雄群体，其中F3代雄鱼全部是基因型为cyp17a1--XX的伪雄鱼，由此规模化获得伪雄鱼亲本种群。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院水生生物研究所 规模化获得XX/XY性别决定的伪雄鱼亲本的育种方法及其应用