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申请/专利权人：东北大学
摘要：本发明公开了一种基于工程大肠杆菌的MERS‑CoV病毒检测系统，属于基因工程领域，该工程菌包括PmrAPmrB双组分系统和LuxILuxR群体感应系统；其中，所述PmrAPmrB双组分系统的跨膜蛋白PmrB的胞外部分替换为待测病毒识别蛋白的受体；本发明根据冠状病毒通过表面刺突蛋白与人体细胞表面受体结合介导进一步感染的感染机制，以大肠杆菌为底盘菌，选用沙门氏菌中的PmrAPmrB双组分系统和革兰氏阴性菌中的LuxILuxR群体感应系统构建工程大肠杆菌以检测冠状病毒，使其可以识别MRES‑CoV的刺突蛋白并发出荧光信号，并对其做安全防护处理使其可以实现病毒的检测。
主权项：1.一种用于病毒检测的工程菌，其特征在于，该工程菌包括PmrAPmrB双组分系统和LuxILuxR群体感应系统；其中，所述PmrAPmrB双组分系统的跨膜蛋白PmrB的胞外部分替换为待测病毒识别蛋白的受体；所述工程菌由IPTG诱导T7启动PmrB和PmrA的表达，当所述工程菌通过PmrAPmrB系统识别病毒后，激活PmrC，启动下游LuxI和LuxR的表达，在LuxI的催化下，革兰氏阴性细菌的酰基高丝氨酸内酯化合物（AHL）开始持续合成，其中一部分会穿透细胞膜到细胞外，当细胞外AHL的浓度达到阈值时，它重新进入细胞，并与LuxR结合形成LuxR-AHL共复合体，所述LuxR-AHL共复合体可以激活相应的启动子Plux并表达绿色荧光蛋白基因EGFP，当少数工程菌检测出病毒时，信息可以通过信号分子AHL传递给其他工程菌，最后菌群均表达绿色荧光蛋白EGFP。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 东北大学 一种基于工程大肠杆菌的MERS-CoV病毒检测系统
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