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申请/专利权人：宁波大学

摘要：本发明提供了一种可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质提取方法，包括以下步骤：S1、采集可口革囊星虫腔液；S2、从腔液中分离出腔液细胞；S3、将提取液加入腔液细胞，混匀并使细胞完全裂解，裂解液离心，取上清液离心，去除沉淀及杂质，得到抗菌物质抽提液；S4、将抽提上清液用沸水浴处理，离心去除不耐热的蛋白及杂质沉淀，得到抗菌物质纯化液；S5、对抗菌物质纯化液用透析液进行透析，透析后进行离心超滤浓缩，得到可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质。本发明方法得到的抗菌活性物质广谱抗菌，且具有很强的耐热性，具有很好的应用前景。

主权项：1.一种可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、采集可口革囊星虫腔液；S2、从腔液中分离出腔液细胞，所述步骤S2具体包括：将步骤S1得到的腔液在2-5℃环境中静置8-12h，进行离心，离心机转速为3000-4000rpmmin，除去上清液，得到底部白色的腔液细胞；S3、将提取液加入腔液细胞，提取液由乙酸和0.01MPBS缓冲液配置而成，提取液中乙酸浓度为10%，混匀并使细胞完全裂解，裂解液离心，取上清液离心，去除沉淀及杂质，得到抗菌物质抽提液；所述步骤S3具体包括：S31、将提取液加入步骤S2获得的腔液细胞，在涡旋震荡器中充分混匀并使细胞完全裂解；S32、将裂解液于常温下离心5-10min，离心机转速为4000-5000rpmmin，取上清液；S33、将上清液于常温下离心10-15min，离心机转速为12000-15000rpmmin，弃除沉淀及最上层白色脂质等杂质，保留上清液得到抗菌物质抽提液，所述步骤S33中将步骤S32得到的上清液离心2-5次；S4、将抽提上清液用沸水浴处理，离心去除不耐热的蛋白及杂质沉淀，得到抗菌物质纯化液；S5、对抗菌物质纯化液用透析液进行透析，透析后进行离心超滤浓缩，得到可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质；所述步骤S5具体包括：S51、将步骤S4获得的抗菌物质纯化液放入孔径为1kD的透析袋中，置于透析液中，在2-5℃温度下透析12-24h；S52、将透析袋置于新的透析液中，在2-5℃温度下透析12-24h；S53、透析上清用1kD超滤管进行离心超滤浓缩，所得上清液为可口革囊星虫腔液细胞的抗菌活性物质。

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