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申请/专利权人：郑州大学
申请日：2023-09-20
公开（公告）日：2023-12-19
公开（公告）号：CN117247996A
主分类号：C12Q1/6844
分类号：C12Q1/6844;C12Q1/6825;C12Q1/6886
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.01.05#实质审查的生效;2023.12.19#公开
摘要：本发明属于电化学生物传感器领域，涉及CYFRA21‑1的灵敏检测，特别是基于DNAwalker与SDR的CYFRA21‑1无酶级联扩增检测方法和应用。通过结合熵驱动的DNAwalker与双输出Toehold介导SDR的无酶级联扩增检测策略，用于灵敏检测CYFRA21‑1的电化学生物传感器。DNAwalker的引入能够多次引发TMSDR，将单个目标物的输入转化为多个信号探针SP的输出，并被捕获至电极表面，产生显著增强的电化学信号，在提高TMSDR反应效率的同时提高传感器的灵敏度。
主权项：1.基于DNAwalker与SDR的CYFRA21-1无酶级联扩增检测方法，其特征在于，步骤如下：（1）分别配制底物链T1SP、燃料链FW及发夹探针HP的缓冲溶液；（2）向活化的MBs溶液中加入底物链T1SP的缓冲溶液，经振荡过夜反应后进行磁分离并反复洗涤，再加入PBS重悬得T1SPMBs悬浮液；（3）向步骤（2）的T1SPMBs悬浮液中加入待测样品、燃料链FW的缓冲溶液，经恒温振荡反应后进行磁分离，取上清液作为样品检测液；（4）金电极经食人鱼溶液预处理后，用氧化铝浆液进行抛光并超声清洗，再在H2SO4溶液中进行电化学清洗与活化，所得的金电极表面上滴加经TCEP还原的发夹探针HP的缓冲溶液，孵育后洗涤，再在MCH溶液中孵育得HP修饰的电极；（5）将步骤（3）的样品检测液滴加至步骤（4）HP修饰的电极表面进行反应，再进行电化学信号测定峰值电流，代入浓度与峰值电流之间的线性关系方程式即可检测待测样品中的CYFRA21-1。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 郑州大学 基于DNA walker与SDR的CYFRA21-1无酶级联扩增检测方法和应用
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