申请/专利权人：青岛科技大学

申请日：2023-10-16

公开（公告）日：2024-01-05

公开（公告）号：CN117347455A

主分类号：G01N27/30

分类号：G01N27/30;G01N27/327;G01N21/76

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.23#实质审查的生效;2024.01.05#公开

摘要：本发明研制了一种新型HOF基电化学发光生物传感器，开发了一种用于土霉素检测及成像分析的新方法。新型氢键有机骨架HOF‑101具有优越的电化学发光性能，用作传感器的信号材料，聚多巴胺纳米球作为猝灭剂，采用双适体夹心法通过目标引入聚多巴胺纳米球，猝灭电极上HOF‑101的ECL信号，通过ECL信号变化实现对土霉素的ECL检测及成像分析。

主权项：1.一种HOF基电化学发光生物传感器用于土霉素检测及成像分析的方法，其特征是：利用聚多巴胺纳米球猝灭氢键有机骨架HOF-101的电化学发光，研制ECL传感器，实现对土霉素的检测及成像分析；具体步骤：步骤1.HOF-101的制备：将150mg1,3,6,8-四4-羧基苯芘溶于22.5mLN,N-二甲基甲酰胺中，再加入90mL甲醇搅拌1min，室温静置12h，得到HOF-101黄色块状晶体；步骤2.聚多巴胺纳米球的制备：将2mL28-30％氨水、40mL乙醇和90mL去离子水混合，在30℃下温和搅拌30min，然后将0.5g盐酸多巴胺溶于10mL去离子水中，随后将多巴胺溶液注射到上述混合溶液中；该混合溶液的颜色立即变成淡黄色，然后逐渐变成深褐色；反应24h，用二次水离心纯化多次，60℃真空干燥得到聚多巴胺纳米球PDAs；步骤3.制备PDAs-适体Ⅱ探针:将100μL500μg·mL-1PDAs与100μL1μM土霉素OXY适体Ⅱ链混合，在37℃孵育1h，二次水纯化后重新分散到0.1MpH＝7.4磷酸盐缓冲液中；步骤4.ECL生物传感器的制备及土霉素检测：将10μL0.5mgmLHOF-101滴到干净金电极表面，自然干燥成膜；然后将10μL400mMEDC和100mMNHS混合溶液滴到电极表面，在室温下孵育2h用于活化HOF-101表面羧基；然后将10μL1μM适体Ⅰ链滴到电极表面，在室温下孵育5h；接着将10μL1％的牛血清白蛋白滴到电极表面，在37℃下孵育1h；然后在电极表面修饰上10μL不同浓度的目标OXY,并在37℃下孵育2h；最后将10μLPDAs-适体Ⅱ探针滴至电极表面，在37℃孵育2h，最后自然干燥，进行ECL检测；注：上述每一步都用蒸馏水洗涤，防止非特异性吸附；步骤5.ECL检测以及手机成像参数设定：采用经典的三电极系统，金电极为工作电极，铂丝为对电极，饱和AgAgCl电极作为参比电极；光电倍增管设置在300V，电压范围设定为0～1.5V，扫描速率为0.1Vs，检测溶液为0.1MPBS含0.1M三正丙胺；ECL成像只需要一个暗室、一部手机和一个电化学工作站，其余参数不变。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 青岛科技大学 一种HOF基电化学发光生物传感器用于土霉素检测及成像分析的方法

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