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融合型HMG-pfu DNA聚合酶及其制备方法和应用 

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申请/专利权人:核小体(北京)生物技术有限公司

摘要:本发明提供了一种融合型HMG‑pfuDNA聚合酶,涉及生物工程技术领域,所述融合型HMG‑pfuDNA聚合酶为野生型pfuDNA聚合酶的N端C端连接一段DNA结合蛋白HMG后构成的DNA聚合酶,所述野生型pfuDNA聚合酶和DNA结合蛋白HMG的氨基酸序列分别如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2所示。本发明通过HMG蛋白与野生型pfuDNA聚合酶进行融合,实现重组蛋白的定向组装,提高了DNA聚合酶的加工效率,但不影响其催化活性、热稳定性和酶的纯度。本发明所述的融合DNA聚合酶是由HMGDNA结合蛋白与酶的聚合酶结构域的共价融合而产生的,成功的替代传统方法,用于获得无错误的长DNA模板扩增。此外,本发明的制备方法提高了pfuDNA聚合酶的纯度。

主权项:1.一种融合型HMG-pfuDNA聚合酶,其特征在于,所述融合型HMG-pfuDNA聚合酶为野生型pfuDNA聚合酶的N端C端连接一段DNA结合蛋白HMG后构成的DNA聚合酶,所述野生型pfuDNA聚合酶和DNA结合蛋白HMG的氨基酸序列分别如SEQIDNo.1、SEQIDNo.2所示。

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