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一种欧洲冬青‘FeroxArgentea’离体快繁方法 

申请/专利权人:南京林业大学

申请日:2023-04-25

公开(公告)日:2024-02-09

公开(公告)号:CN116530413B

主分类号:A01H4/00

分类号:A01H4/00

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.02.09#授权;2023.08.22#实质审查的生效;2023.08.04#公开

摘要:本发明公开了一种欧洲冬青‘FeroxArgentea’离体快繁方法,包括以下步骤:外植体取材;消毒灭菌;启动培养;增殖培养;生根培养;炼苗移栽。本发明首次构建了高效的欧洲冬青离体快繁技术,该技术条件下,试管苗增殖率2.62、生根率100%、移栽成活率74.58%,这将为欧洲冬青‘FeroxArgentea’离体快繁和产业化推广提供技术支撑。与欧洲冬青的传统繁殖方法播种、嫁接相比,该技术属于试管内无菌培养,繁殖过程不受时间限制,能够实现周年生产。

主权项:1.一种欧洲冬青‘FeroxArgentea’离体快繁方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体取材:早春3-4月,选取健壮,无病虫害的母株,切取幼嫩的一年生具腋芽茎段作为外植体;(2)消毒灭菌:将茎段用流水冲洗30-60min,然后洗涤剂浸泡15-20min,再用流水冲洗20-30min;随后,将材料转至超净工作台用75%酒精灭菌25-35s,然后用3-5%次氯酸钠灭菌10min-15min,最后无菌水冲洗3~4次作为接种材料;(3)启动培养:将消毒灭菌后的茎段切分为含有1-2个节的小茎段,将其接种于启动培养基培养;启动培养的培养基为WPM+BA0.5mgL+NAA0.1mgL+蔗糖30.0gL+琼脂6.5gL,pH=5.8;(4)增殖培养:初代培养50d后,切取外植体上茎长≥1cm的健壮腋芽进行增殖培养;增殖培养的培养基为:特制培养基+0.5mgLBA+0.05mgLNAA+30gL蔗糖+6.8gL琼脂,pH5.8;特制培养基大量元素配方为K2SO4495.00mg·L-1、NH4NO31200.00mg·L-1、MgSO4·7H2O529.10mg·L-1、KH2PO4362.27mg·L-1与CaNO32·4H2O1279.92mg·L-1,其余成分与WPM培养基一致;(5)生根培养:增殖培养50d后,切取无根试管苗接入生根培养基;生根培养的培养基为:特制培养基+0.5mgLIBA+0.5mgLNAA+30gL蔗糖+6.8gL琼脂,pH5.8;特制培养基大量元素配方为NH4NO3412.5mg·L-1、KNO3935.75mg·L-1、CaCl2·2H2O173.14mg·L-1、MgSO4·7H2O92.5mg·L-1、KH2PO442.5mg·L-1,其余成分与12MS培养基一致;(6)炼苗移栽:将生根的欧洲冬青‘FeroxArgentea’试管苗开盖炼苗3天后,移栽入混合基质,混合基质的体积比为泥炭:蛭石:珍珠岩=1:1:1;浇水定根,培养。

全文数据:

权利要求:

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