申请/专利权人：南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心)

申请日：2024-01-04

公开（公告）日：2024-04-23

公开（公告）号：CN117535333B

主分类号：C12N15/74

分类号：C12N15/74;C12N15/31;C12N1/21;A61K39/095;A61P31/04;C12R1/36

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.23#授权;2024.03.01#实质审查的生效;2024.02.09#公开

摘要：本发明提供了一种促进淋球菌外膜囊泡分泌的方法、淋球菌敲除株及其制备方法和应用，涉及微生物技术领域。本发明通过降低和或抑制淋球菌中MlaA基因；和或，降低和或抑制MlaA蛋白促进淋球菌外膜囊泡分泌；本发明通过敲除质粒介导的同源重组敲除淋球菌中的MlaA基因，获得了MlaA基因缺失的淋球菌敲除株，为淋球菌的基础研究和应用提供了物质和方法基础。

主权项：1.敲除淋球菌MlaA基因的方法，其特征在于，包括使用敲除质粒介导同源重组片段替换淋球菌MlaA基因；所述同源重组片段包括MlaA基因上游同源臂、氯霉素抗性基因和MlaA基因下游同源臂，所述敲除质粒中含有筛选标记基因，筛选标记基因位于非同源重组区域；所述敲除质粒为pCVD442，筛选标记基因为sacB基因；所述方法包括将含有所述敲除质粒的供体菌和受体菌混合，然后在含有氯霉素的培养基上培养，筛选阳性克隆；然后将筛选的阳性克隆在含有蔗糖的培养基中培养，再次筛选阳性克隆；所述受体菌为待敲除MlaA基因的淋球菌；所述供体菌为大肠杆菌β2155菌；所述受体菌为淋球菌WHOL株；所述上游同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述下游同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南方医科大学皮肤病医院(广东省皮肤病医院、广东省皮肤性病防治中心、中国麻风防治研究中心) 促进淋球菌外膜囊泡分泌的方法、淋球菌敲除株及其制备方法和应用

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