申请/专利权人：南京师范大学

申请日：2021-12-23

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN114507712B

主分类号：C12Q1/6818

分类号：C12Q1/6818;G01N33/53;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.19#授权;2022.06.03#实质审查的生效;2022.05.17#公开

摘要：本发明公开了一种基于CRISPRCas12的肝素检测方法及其检测试剂盒，该检测方法步骤为1设计DNAprobe和crRNA序列；2将crRNA，Cas12a，缓冲液，肝素、FQ预组装后加入DNAprobe进行孵育，孵育后进行灭活后进行荧光测定。本发明将肝素与Cas12a结合，影响Cas12a‑crRNA复合物形成，抑制该复合物中Cas12a的RuvC结构域的DNase活性，阻碍切割携带荧光团和猝灭团双修饰的单链DNA，通过检测荧光即可得知待检样品中是否含有肝素及其含量。本发明的检测方法操作方便快捷，检测成本低廉，对临床肝素用量的早期监测诊断与防控具有重要意义，具有广阔的应用前景。

主权项：1.一种基于CRISPRCas12的肝素检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）设计DNAprobe和crRNA序列；（2）将crRNA，Cas12a，缓冲液，ssDNA-FQ，肝素预组装后加入DNAprobe进行孵育，孵育后进行灭活，灭活后再进行荧光测定；所述crRNA为crRNA1-crRNA18中的任一种或任几种的组合，其中crRNA1-crRNA18的序列分别如SEQIDNO.1-18所示；所述DNAprobe序列分别如SEQIDNO.19-36所示，其分别对应crRNA1-crRNA18的序列SEQIDNO.1-18；所述ssDNA-FQ为6-FAM-TTATT-BHQ1。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京师范大学 一种基于CRISPR/Cas12的肝素检测方法及其检测试剂盒

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