申请/专利权人：中国农业大学

申请日：2024-01-25

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925492A

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12N15/61;C12N15/56;C12N15/53;C12N15/54;C12N15/62;C12N9/12;C12N9/90;C12N9/04;C12N9/10;C12N9/38;C12P19/00;C12N15/52;C12R1/19

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明公开了一种从头高效合成二岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌构建及应用。该重组大肠杆菌为下述任一种：1含有磷酸甘露糖变位酶基因、甘露糖‑1‑磷酸鸟苷基转移酶基因、GDP‑甘露糖‑4,6‑脱水酶基因和GDP‑L‑岩藻糖合成酶基因、α‑1,2‑岩藻糖基转移酶基因和α‑1,34‑岩藻糖基转移酶基因；2含有1的基因，不含有β‑半乳糖苷酶基因和UDP‑葡萄糖脂质载体转移酶基因中的至少一种，重组菌摇瓶发酵DFL产量高达5.07gL；3除具有2的特征外，还含有甘露糖‑6‑磷酸异构酶基因；4除具有3的特征外，不含有GDP‑D‑甘露糖水解酶基因；5除具有4的特征外，α‑1,34‑岩藻糖基转移酶与热休克蛋白GroES和GroEL、麦芽糖结合蛋白MBP、硫氧还蛋白ATrxA、转录终止抗终止因子NusA和蛋白二硫异构酶DsbA基因中的至少一种共表达,重组菌摇瓶发酵DFL产量提高到6.58gL；6除具有5的特征外，在重组菌分批补料发酵的过程中，采用氨水和氢氧化钠混合液调节发酵液的pH值和提供无机氮源。该重组大肠杆菌在5L发酵罐中DFL产量为30～50gL之间，具有工业化生产的潜力。

主权项：1.重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌为下述任一种：A1所述重组大肠杆菌含有磷酸甘露糖变位酶基因、甘露糖-1-磷酸鸟苷基转移酶基因、GDP-甘露糖-4,6-脱水酶基因、GDP-L-岩藻糖合成酶基、α-1,2-岩藻糖基转移酶基因和α-1,34-岩藻糖基转移酶基因，不含有β-半乳糖苷酶基因和UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因；A2所述重组大肠杆菌含有磷酸甘露糖变位酶基因、甘露糖-1-磷酸鸟苷基转移酶基因、GDP-甘露糖-4,6-脱水酶基因、GDP-L-岩藻糖合成酶基、α-1,2-岩藻糖基转移酶基因、α-1,34-岩藻糖基转移酶基因和甘露糖-6-磷酸异构酶基因，不含有β-半乳糖苷酶基因和UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因；A3所述重组大肠杆菌含有磷酸甘露糖变位酶基因、甘露糖-1-磷酸鸟苷基转移酶基因、GDP-甘露糖-4,6-脱水酶基因、GDP-L-岩藻糖合成酶基、α-1,2-岩藻糖基转移酶基因、α-1,34-岩藻糖基转移酶基因和甘露糖-6-磷酸异构酶基因，不含有β-半乳糖苷酶基因、UDP-葡萄糖脂质载体转移酶基因和GDP-D-甘露糖水解酶基因。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业大学 一种从头高效合成二岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌构建及应用

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