申请/专利权人：常熟理工学院

申请日：2024-01-05

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925523A

主分类号：C12N5/0784

分类号：C12N5/0784;C12N5/09;C12Q1/02

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明公开了细胞因子诱导THP‑1细胞分化为未成熟树突细胞的方法及其在肝素类产品免疫原性质量评价中的应用，THP‑1细胞通过细胞因子诱导分化为未成熟树突细胞，进一步通过流式细胞术测定PF4‑肝素复合物处理未成熟DCs后，细胞表面CD14和CD83标志物的变化，评价肝素类产品的免疫原性；本发明有助于解决普通药企人外周血单核细胞难以大量获得的难题，同时也规避了通用的五羟色胺释放实验操作繁琐、耗费较大等问题；本发明验证：1肝素类产品与PF4在极窄的摩尔比值下能够诱导DCs成熟，介导免疫反应，促使HIT；2肝素与PF4形成的复合物诱导DCs成熟的作用显著高于相同效价下低分子量肝素与PF4形成的复合物。

主权项：1.细胞因子诱导THP-1细胞分化为未成熟DCs的方法，其特征在于：对数生长期THP-1细胞离心，完全培养基重悬并调整细胞密度，接种于孔板中，在第1天，孔板各孔中添加GMC-SF和IL-4，细胞培养基与GMC-SF的体积比为100:0.5-2，细胞与IL-4的体积比为100:0.5-2，所述GMC-SF和IL-4的体积比1:1；第3天，半量换液，孔板各孔中添加GMC-SF和IL-4，细胞培养基与GMC-SF的体积比为100:0.5-2，细胞培养基与IL-4的体积比为100:0.5-2，所述GMC-SF和IL-4的体积比1:1；第5天，半量换液，得到未成熟DCs。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 常熟理工学院 THP-1细胞分化为未成熟树突细胞的方法及其在肝素类产品免疫原性质量评价中的应用

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