申请/专利权人:广州赛莱拉生物基因工程有限公司;广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司
申请日:2021-07-09
公开(公告)日:2024-04-26
公开(公告)号:CN115125193B
主分类号:C12N5/073
分类号:C12N5/073;C12N5/077
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.26#授权;2022.10.25#实质审查的生效;2022.09.30#公开
摘要:本发明涉及动物脐带提取技术领域,公开了一种动物脐带提取物及其提取方法和应用。本发明所述提取方法将动物脐带组织速冻,然后研磨出均匀粉状组织,加入缓冲液后在‑80℃和室温下反复冻融3次;冻融后的产物超声处理、离心,上清液继续超声处理,过滤,获得所述外泌体。本发明提取方法完全采用物理提取的方法并保持整个提取过程的低温环境,避免了目前其他制备工艺引入的酶类、有机溶剂或高温等影响终产品质量和活性的不利因素;同时,本发明提取工艺结合脐带的结构特点通过冻融、超声、过滤等物理学方法逐步去除其他成分,最终获得了富含外泌体的无菌产物,并通过鉴定实验及功能验证实验,充分证实了本发明已建立了稳定脐带外泌体的制备工艺。
主权项:1.一种动物脐带外泌体的提取方法,其特征在于,包括:步骤1、将动物脐带组织用液氮速冻,然后研磨出均匀粉状组织;步骤2、所述粉状组织加入缓冲液,在-80℃和室温温度下反复冻融3次;步骤3、将冻融后的产物超声处理;步骤4、超声处理后进行离心,上清液继续超声处理,然后进行过滤,获得所述外泌体;所述动物脐带组织为牛脐带组织;所述冻融的时间为冷冻时间解冻时间:2h2h;所述超声处理为:功率500w,时间30min,运行停止时间:8s8s。
全文数据:
权利要求:
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