申请/专利权人：北京东方红航天生物技术股份有限公司

申请日：2023-12-26

公开（公告）日：2024-06-04

公开（公告）号：CN117783404B

主分类号：G01N30/86

分类号：G01N30/86;G01N30/02;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.06.04#授权;2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明涉及西洋参鉴定防伪技术领域，具体涉及一种西洋参产地溯源的方法与应用。本发明通过液相色谱‑质谱联用检测西洋参样品中人参皂苷的种类以及相对含量，采用正交偏最小二乘‑判别分析方法和单变量的非参数检验筛选人参皂苷类差异化合物，以任意两种人参皂苷类差异化合物的比值作为变量，进行非参数检验，获取质量标志物，获取测试样品中乙酰基‑人参皂苷Re与丙二酰基‑人参皂苷Re的比值、乙酰基‑人参皂苷Re与丙二酰基‑拟人参皂苷F11的比值和乙酰基‑人参皂苷Re与西洋参皂苷L9的比值，与质量标志物比较，对西洋参产地进行溯源。本发明提供的西洋参产地溯源的方法可以有效的鉴别国内以及国外的西洋参。

主权项：1.一种西洋参产地溯源的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将不同产地的西洋参样品加入甲醇中，超声提取，过滤后得供试品溶液；（2）通过液相色谱-质谱联用检测供试品溶液，获取不同产地的西洋参样品中人参皂苷的种类以及相对含量；（3）采用正交偏最小二乘-判别分析方法和单变量的非参数检验筛选人参皂苷类差异化合物，以任意两种人参皂苷类差异化合物的比值作为变量，进行非参数检验，获取质量标志物，所述质量标志物包括：乙酰基-人参皂苷Re与丙二酰基-人参皂苷Re的比值国外组为2.9~4.4，国内组为4.9~6.6；乙酰基-人参皂苷Re与丙二酰基-拟人参皂苷F11的比值国外组为1.5~2.2，国内组为2.4~4.3；乙酰基-人参皂苷Re与西洋参皂苷L9的比值国外组为4.0~6.5，国内组为6.8~11.7；（4）获取测试样品中乙酰基-人参皂苷Re与丙二酰基-人参皂苷Re的比值、乙酰基-人参皂苷Re与丙二酰基-拟人参皂苷F11的比值和乙酰基-人参皂苷Re与西洋参皂苷L9的比值，与步骤（3）中质量标志物比较，对西洋参产地进行溯源；其中，步骤（2）中，液相色谱条件：AgilentSB-Aq柱色谱柱，流动相A为0.1%甲酸水溶液，流动相B为0.1%甲酸的乙腈溶液，梯度洗脱，柱温为40ºC，流速为0.3mLmin，进样量5μL；AgilentSB-Aq柱色谱柱规格为100mm×2.1mm、1.8μm；步骤（2）中，质谱条件：电喷雾离子源，以负离子模式扫描采集数据；毛细管电压：3000V；干燥气流速：8Lmin；雾化气压力：200kpa；干燥气温度：200℃；四极杆离子能量：3eV；碰撞池参数：碰撞能7eV，传输时间60μs，碰撞池射频电压振幅：750Vpp，脉冲前等待时间：5μs；质量数扫描范围：mz50~1500；步骤（3）中，采用偏最小二乘-判别分析方法获取和单变量的非参数检验筛选人参皂苷类差异化合物，以任意两种人参皂苷类差异化合物的比值作为变量，进行非参数检验，获取质量标志物的方法包括：将国外与国内的西洋参样品进行分组，分为一组和二组，将一组和二组人参皂苷的相对含量进行正交偏最小二乘-判别分析方法进行多变量分析，得到变量重要性指标VIP，后通过对一组和二组人参皂苷的相对含量进行非参数检验，得到第一显著性指标p值，并对第一显著性指标p值进行假阳性检验，得到第一p（FDR）值，最后对一组和二组人参皂苷的相对含量进行比值计算，得到倍率B指标；以变量重要性指标VIP1，第一p（FDR）0.05以及倍率B1.5作为筛选标准，筛选出11种人参皂苷类差异化合物，包括乙酰基-人参皂苷Re，丙二酰基-人参皂苷Rb1，丙二酰基-拟人参皂苷F11，越南人参皂苷R13，三七皂苷N，人参皂苷Ro，三七皂苷R1，三七皂苷ST5，珠子参皂苷R1，丙二酰基-人参皂苷Re，西洋参皂苷L9；基于筛选出的这11种人参皂苷类差异化合物，计算其中任意两者的比值，共获得55组比值，以比值作为变量，对这55组比值进行非参数检验，得到第二显著性指标p值，并对第二显著性指标p值进行假阳性检验，得到第二pFDR值，筛选第二pFDR0.05的变量为质量标志物。

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百度查询： 北京东方红航天生物技术股份有限公司 一种西洋参产地溯源的方法与应用

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