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一种快速提取水稻种子DNA的方法及其在PCR检测水稻种子是否携带恶苗病菌中的应用 

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申请/专利权人:浙江省农业科学院;衢州市农业林业科学研究院

摘要:本发明公开一种快速提取水稻种子DNA的方法及其在PCR检测水稻种子是否携带恶苗病菌中的应用。所述DNA提取方法包括如下步骤:将水稻种子置于无菌离心管I中,加氢氧化钠溶液剧烈振荡;取上清液于离心管II中离心处理,取离心后的上清液于离心管III中,加入异丙醇颠倒混均匀后,再次离心处理;弃上清液,于离心管III中加入乙醇洗涤,后于离心处理2‑5min;倒掉上清液,室温干燥后,加入ddH2O,充分溶解DNA。本发明以水稻种子直接材料提取DNA,省去病原菌的分离、保存、培养等前期准备过程;缩短DNA提取的时间,减少工作繁琐性,满足基层快速、简单、大量检测的需求;提取的DNA可直接用作PCR扩增模板,可用于快速、准确的检测稻种是否携带恶苗病菌,缩短检测时间。

主权项:1.一种快速提取水稻种子DNA的方法,其特征在于,包括如下工艺步骤:S1:将水稻种子置于无菌离心管I中,加入氢氧化钠溶液,剧烈振荡;S2:取一定量步骤S1振荡后的上清液于离心管II中,于10000-12000gmin离心处理3-5min;S3:取一定量步骤S2离心后的上清液于离心管III中,加入异丙醇颠倒混均匀数次后,于10000-12000gmin离心处理5-10min;S4:弃步骤S3离心后的上清液,于离心管III中加入乙醇洗涤,后于10000-12000gmin离心处理2-5min;S5:倒掉步骤S4离心后的上清液,室温干燥后,加入ddH2O,充分溶解DNA。

全文数据:

权利要求:

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