申请/专利权人:爱科睿特生物医疗科技(南京)有限公司
申请日:2024-03-27
公开(公告)日:2024-06-07
公开(公告)号:CN118147347A
主分类号:C12Q1/6895
分类号:C12Q1/6895;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/725;C12R1/72;C12R1/74;C12R1/645;C12R1/68;C12R1/785
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.06.25#实质审查的生效;2024.06.07#公开
摘要:本发明公开了一种同时检测9种呼吸道真菌的多重RT‑PCR方法及试剂盒和应用,该实时荧光定量PCR检测试剂盒包括PCR引物探针,所述PCR引物探针包括分别针对白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、球孢子菌、季也蒙念珠菌、烟曲霉菌、新型隐球菌、毛霉菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针;其序列分别如SEQIDNO.1~SEQIDNO.27所示,本发明能够同时对9种呼吸道真菌进行快速检测和筛查,且具有较高的灵敏度。
主权项:1.一种同时检测9种呼吸道真菌的多重RT-PCR试剂盒,其特征在于,包括管1试剂、管2试剂、管3试剂和Tap酶;所述管1试剂、管2试剂、管3试剂均包括PCR引物探针缓冲液、病原体引物探针、人DNA内参引物探针;其中,管1试剂内靶标为白色念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌;管2试剂内靶标为热带念珠菌、球孢子菌、季也蒙念珠菌;管3试剂内靶标为烟曲霉菌、新型隐球菌、毛霉菌;白色念珠菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.1~SEQIDNO.3所示;光滑念珠菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.4~SEQIDNO.6所示;克柔念珠菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.7~SEQIDNO.9所示;热带念珠菌的所述正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.10~SEQIDNO.12所示;球孢子菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.13~SEQIDNO.15所示;季也蒙念珠菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.16~SEQIDNO.18所示;烟曲霉菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.19~SEQIDNO.21所示;新型隐球菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.22~SEQIDNO.24所示;毛霉菌的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.25~SEQIDNO.27所示;人DNA内参的正向PCR扩增引物、反向PCR扩增引物及检测探针的序列分别如SEQIDNO.28~SEQIDNO.30所示。
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