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申请/专利权人：江苏师范大学;阔然医学检验实验室(徐州)有限公司
申请日：2024-03-01
公开（公告）日：2024-06-07
公开（公告）号：CN118147365A
主分类号：C12Q1/70
分类号：C12Q1/70;C12Q1/6816;C12N15/11;C12R1/93
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.25#实质审查的生效;2024.06.07#公开
摘要：本发明提出了一种人体乳头瘤病毒检测方法，包括：球形核酸制备；Ag‑Au卫星结构偶联体制备；HPV识别与信号转化；HPV信号输出。本发明一方面采用先制备杂交体后切割的方法，避免了先切割后杂交存在的易受杂交条件影响的问题，提高了检测的重复性和准确性；另一方面，利用ssDNA互补杂交制备Ag‑Au卫星偶联体时采用了两条链，提高了杂交的效率和速度；而在单分子水平直接计数克服了宏观检测的局限性，大大提高了检测的灵敏度。
主权项：1.一种人体乳头瘤病毒检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、球形核酸制备，将银纳米粒子AgNPs与DNA1混合，金纳米粒子AuNPs与DNA2混合，制备球形核酸探针AgNPs-ssDNA1、AuNPs-ssDNA2；步骤2、制备Ag-Au卫星结构偶联体，将球形核酸探针AgNPs-ssDNA1、AuNPs-ssDNA2进行混合、杂交偶联，得到具有卫星结构的Ag-Au偶联体；步骤3、配制CRIPSRCas12a体系，将靶标HPV对应的crRNA、Cas12a蛋白于缓冲溶液中混合，配制成CRIPSRCas12a体系；步骤4、HPV识别与信号转化，向CRIPSRCas12a体系中加靶标入HPV，进行靶标识别后，加入步骤2所制备的Ag-Au卫星结构偶联体，孵育，切割；步骤5、HPV信号输出，将步骤4切割后的粒子进行暗场成像，并计数。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏师范大学;阔然医学检验实验室(徐州)有限公司 一种人体乳头瘤病毒检测方法
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