申请/专利权人:北京大学
申请日:2022-12-07
公开(公告)日:2024-06-07
公开(公告)号:CN118146334A
主分类号:C07K14/435
分类号:C07K14/435;C07K19/00;C12N15/70
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.06.07#公开
摘要:本发明公开了一种单结构域荧光蛋白索烃及其构建和在制备融合蛋白索烃中的应用。本发明对荧光蛋白序列进行拆分和重组,结合蛋白质偶联反应对,通过组装‑反应协同的策略实现了单结构域荧光蛋白索烃以及融合蛋白索烃的制备。本发明的方法能够提升蛋白质的热稳定性、机械稳定性以及重折叠能力,可用于探究拓扑重构对于蛋白质构效关系的影响。
主权项:1.一种单结构域荧光蛋白索烃的构建方法,包括以下步骤:1将荧光蛋白拆分为两部分FP1和FP2,分别用于构建蛋白质索烃的两个环;2构建基因卡带,其编码的蛋白质序列从N端到C端包括LN1-FP1-LC1-LN2-FP2-LC2,其中LN1和LC1、LN2和LC2代表两对正交的蛋白质偶联反应对的反应基元;3将步骤2构建的基因卡带引入表达载体中并转入细胞进行表达,得到蛋白质前驱体;4蛋白质前驱体在胞内完成环化得到单结构域荧光蛋白索烃,或者,通过胞内环化和体外关环反应相结合得到单结构域荧光蛋白索烃。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 北京大学 单结构域荧光蛋白索烃及其构建和在制备融合蛋白索烃中的应用
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