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申请/专利权人：西北农林科技大学;榆林学院
申请日：2024-04-23
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN118166039A
主分类号：C12N15/867
分类号：C12N15/867;C12N15/12;A01K67/0275;C12Q1/6888;C12N15/11
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.28#实质审查的生效;2024.06.11#公开
摘要：本发明属于转基因山羊制备技术领域，公开了一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法，其特征在于：（1）构建含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞后超速离心，PBS重悬后获得慢病毒浓缩液；（2）对山羊超数排卵后配种，于最后一次配种后12h冲胚获得受精卵，利用显微操作系统将慢病毒浓缩液注射于受精卵透明带下，胚胎培养液继续培养24h待发育至2细胞进行输卵管移植；（3）利用设计的跨载体引物PCR和qPCR技术检测转基因效率检测鉴定。采用本发明的方法，成功获得过表达BLOC1S1转基因山羊，转基因效率为63.6%。
主权项：1.一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法，其特征在于：将含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒PAX2和VSVG按照4:3:2的比例共转染293T细胞，分别于48h和72h后收集病毒并超速离心，使用50μLPBS重悬后获得慢病毒浓缩液，病毒滴度达1×107IU以上，每管10μL分装后-80℃冷冻保存。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 西北农林科技大学;榆林学院 一种慢病毒载体介导生产BLOC1S1转基因山羊方法
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