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申请/专利权人：铭诚惠众(江苏)药物研究有限公司
申请日：2024-04-11
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN118165964A
主分类号：C12N9/60
分类号：C12N9/60
优先权：
专利状态码：在审-公开
法律状态：2024.06.11#公开
摘要：本发明提供一种重组蛋白酶K的纯化方法，包括如下步骤：S1、向待纯化的重组蛋白酶K发酵液中加入缓冲液A，混匀后进行一次超滤以去除金属离子和分子量小于10kDa杂蛋白；S2、将获得的超滤液泵入用缓冲液A平衡好的阳离子交换柱中，随后用缓冲液A复平衡，再用缓冲液B洗脱，收集洗脱液；S3、向获得的洗脱液中加入缓冲液A，进行超滤浓缩，获得高纯度的重组蛋白酶K；其中，缓冲液A：9～11mMHAc‑NaAc，pH＝5.0～5.5；缓冲液B：9～11mMHAc‑NaAc，1.0～2.0MNaCl，pH＝5.0～5.5。本发明所述方法工艺简单且产品收率和纯度较高，适用于产品的工业级生产。
主权项：1.一种重组蛋白酶K的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、向待纯化的重组蛋白酶K发酵液中加入缓冲液A，混匀后进行一次超滤以去除金属离子和分子量小于10kDa杂蛋白；S2、将步骤S1获得的超滤液泵入用缓冲液A平衡好的阳离子交换柱中，随后用缓冲液A复平衡，再用缓冲液B洗脱，收集洗脱液；S3、向步骤S2获得的洗脱液中加入缓冲液A，进行超滤浓缩，获得高纯度的重组蛋白酶K；其中，缓冲液A：9-11mMHAc-NaAc，pH＝5.0～5.5；缓冲液B：9-11mMHAc-NaAc，1.0～2.0MNaCl，pH＝5.0～5.5。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 铭诚惠众(江苏)药物研究有限公司 一种重组蛋白酶K的纯化方法及其应用
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