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申请/专利权人：上海交通大学医学院附属瑞金医院
申请日：2022-10-11
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN116114656B
主分类号：A01K67/0276
分类号：A01K67/0276
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.11#授权;2023.06.02#实质审查的生效;2023.05.16#公开
摘要：本发明公开了一种红斑狼疮小鼠模型的构建方法及应用，所述红斑狼疮小鼠模型的构建方法通过巨噬细胞条件性敲除RCP基因的方式构建红斑狼疮小鼠模型。本发明构建所得红斑狼疮小鼠有助于红斑狼疮得到机理研究，以及有助于制备和或筛选治疗红斑狼疮药物。
主权项：1.一种红斑狼疮小鼠模型的构建方法，其特征在于，通过巨噬细胞条件性敲除RCP基因的方式构建红斑狼疮小鼠模型，包括以下步骤：S1、通过基因打靶技术构建Rab11fip1基因特异性敲除的打靶载体；S2、打靶载体电转至供体小鼠ES细胞中，通过正负筛选挑选，和PCR鉴定及SouthernBlot分析获得阳性ES细胞；S3、将阳性ES细胞注射入供体小鼠的囊胚中,将注射后的囊胚移植到假孕母鼠体内，生产出小鼠，即为F0代小鼠，提取F0代小鼠尾部DNA，并进行基因型鉴定；S4、鉴定得到的阳性小鼠与同品系的野生型小鼠配种获得F1小鼠；此时获得得F1小鼠为flox杂合子；经PCR鉴定得到的阳性F1小鼠互配后得到F2小鼠，F2代小鼠有25％的概率可以获得flox纯合小鼠；S5、将F2代Flox杂合子小鼠与Lyz2-Cre工具小鼠交配获得的F3代小鼠，PCR鉴定得到基因型为CKO杂合子小鼠，CKO杂合子小鼠与flox纯合小鼠配种传代获得PCR鉴定的CKO纯合小鼠即为Rab11fip1基因特异性敲除的小鼠模型。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海交通大学医学院附属瑞金医院 一种红斑狼疮小鼠模型的构建方法及应用
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