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申请/专利权人：江苏省农业科学院
申请日：2018-12-28
公开（公告）日：2024-06-11
公开（公告）号：CN111378775B
主分类号：C12Q1/6895
分类号：C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.06.11#授权;2021.02.05#实质审查的生效;2020.07.07#公开
摘要：本发明涉及“一种特异性检测水稻稻曲病菌Ustilaginoideavirens的方法及其应用”，属于植物保护领域。该SSR标记是根据SeqIDNo.1所示的序列设计的正反向引物，如SeqIDNo.2和SeqIDNo.3所示，可为PCR技术检测水稻稻曲病菌提供多种引物选择。其步骤如下：1制备待测DNA模板；2预备含有所述待测DNA模板的PCR反应体系；3进行PCR反应及结果观察。本发明设计的高特异性引物具有检测灵敏度高，特异性好的特点，可将水稻稻曲病菌从众多相似的菌株中鉴别出来，为植保工作人员提供可靠的预报参数，以便于及时采取合理的防治措施。
主权项：1.一种特异性检测水稻稻曲病菌的方法及其应用，其步骤如下：1制备待测DNA模板；2预备含有所述待测DNA模板的PCR反应体系；3进行PCR反应及结果观察；其特征在于，所述PCR反应体系中的引物是根据SeqIDNo.1所示序列设计的正、反向引物，所述PCR扩增的阳性产物为SeqIDNo.1所示的序列上正向引物完全互补识别的起始碱基至反向引物完全识别的末端碱基之间的核苷酸片段；所述PCR的反应体系为：2×TaqPlusMasterMix10μL、正反向引物各0.5μL，浓度为10nM，DNA模板1μL，含量为50ng，灭菌超纯水8μL，总体积为20μL；所述PCR的反应程序为：194℃预变性3min；294℃变性30s；364℃退火30s；472℃延伸30s；步骤2到步骤4执行35个循环，最后72℃延伸5min，4℃保温；所述引物为：正向引物SSR1-F：5’-CTCGAAACACGGCGCAACCAG-3’；反向引物SSR1-R：5’-TTATGCAGTGCTGATCTGGC-3’，扩增阳性产物为437bp。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江苏省农业科学院 一种特异性检测水稻稻曲病菌的方法及其应用
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